3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea 取扱説明書

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3

発行日：2019-01

製品情報

分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

製品の概要および用途

3M™分子検出アッセイ2 -

カンピロバクターは、

3M™分子検出システムを用いて前培養した食品および食品製造工程中環境検体

におけるカンピロバクター属菌（

Campylobacter jejuni、Campylobacter lari

および

Campylobacter coli

）を迅速かつ特異的に

検出するときに使用します。

3M病原菌検出アッセイは、増幅した菌を検出するために、高い特異性と感度で核酸配列を迅速に増幅するLAMP法と、生物発光

を組み合わせています。推定陽性結果はリアルタイムに表示され、陰性結果は検査が完了してから表示されます。結果が陽性と推

定される場合は、任意の別の方法または行政の規制によって指定されたとおりに確認する必要があります

（1,2）

。

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、検査技術の訓練を受けた技術者が検査室境で使用することを想定しています。3M

は、食品または飲料以外の産業における本製品の使用に関しては検証しておりません。たとえば、3Mは、本製品を医薬品、化粧品、

臨床または動物診断検体の検査で使用することについて検証しておりません。3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、可能

性のあるすべての食品や食品製造工程、検査プロトコル、あるいはすべての菌株について評価されたわけではありません。

すべての検査法と同様に、増菌ブロスのメーカーや組成、品質などの要因が結果に影響する場合があります。採取方法、検査プロ

トコル、検体の準備、取り扱い、および検査手技などの要因が結果に影響する場合もあります。3Mは、検査方法がお客様の基準を

確実に満たすように、お客様の環境において、特定の食品および微生物負荷を用いて十分な数の検体で、増菌ブロスを含む検査方

法を評価することをお勧めします。

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

と3M™

カンピロバクター

属菌増菌ブロスと血液非含有ボルトン増菌ブロスとの併用に

対する評価は実施されています。

3M™分子検出装置自動検出システム用は、アッセイのライシスステップ中に熱処理を行った検体を測定することを目的としてお

り、検体中に存在する微生物を溶菌するように設計されています。アッセイのライシスステップ中に適切な熱処理を行っていない検

体は、潜在的バイオハザードと考えられる可能性がありますので、3M分子検出装置自動検出システム用の装置内には入れないで

ください。

3M食品衛生関連製品部門は、設計と製造についてISO（国際標準化機構）9001認証を取得しています。

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

検査キットは、表1に記載のとおり96検体用となっています。

表1.3M病原菌検出アッセイキットの内容

品目特徴数量内容コメント

3M™ライシス液（LS溶液）

クリアチューブに入った

ピンク色の液体

96検査分

（8連チューブ12セット）

チューブ1 本につきLS

580 μL

ラック入り、調

整済み

3M™分子検出アッセイ2 -

カンピ

ロバクター

試薬チューブ

紫色チューブ

96検査分

（ 8 連チューブ 4 セット入

り3パウチ）

凍結乾燥済み特異的

増幅試薬および検出

試薬

調整済み

予備キャップ紫色キャップ

96検体分

（8連キャップ12セット）

調整済み

3M™試薬コントロール（RC）

フリップトップ式クリア

チューブ

16検査分

（チューブ8本入り2パ

ウチ）

凍結乾燥済みコント

ロールDNA、増幅試

薬および検出試薬

調整済み

陰性コントロール（NC：キットには付属しません）は、3M

カンプロバクター

属菌用増菌ブロスなどの滅菌増菌ブロスです。水は陰性

コントロールとして使用しないでください。

クイックスタートガイドは、www.3M.com/foodsafetyでご覧いただけます。

安全性

3M分子検出システムおよび3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

の製品情報に記載のすべての安全情報を読み、理解し、遵

守してください。また、今後参照できるように、この安全性指示を保管しておいてください。

警告：警告は、それを避けなければ死亡または重篤な傷害ないし物的損害が発生しうる危険な状況を示します。

注記：回避できない場合、物的損害が起こり得る危険な状況を示します。

（日本語）

JA

178

W 警告

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、ヒトまたは動物の病態診断に使用しないでください。

検査実施担当者に適切な検査技術を身につけるように指導してください（例：GLP

（3）

、ISO/IEC 17025

（4）

、ISO 7218

（5）

）。

汚染製品の出荷につながる偽陰性結果に伴うリスクを回避するために：

• プロトコルに従い、製品情報に記載のとおりに検査を行ってください。

• 3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、外箱表示および製品情報に記載のとおりに保管してください。

• 3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、有効期限までに必ず使用してください。

• 製品情報に従って3M™

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスを調製してください。

• 3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスをオートクレーブで加熱滅菌処理しないでください。

• 3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、社内または第三者による検証を行った食品検体および環境検体に使用してくだ

さい。

• 3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、社内または第三者による検証を行った表面、殺菌剤、プロトコル、菌株のみに使

用してください。

• アリルスルホン酸塩添加中和緩衝液を含む環境検体については、試験前に1:2の希釈（検体1に対し

て滅菌増菌ブロス1）を行ってください。別の方法としては、中和緩衝液増菌ブロス10 μLを3Mライシ

スチューブに滴下します。3M™検体処理製品のうち、アリルスルホン酸塩添加中和緩衝液を含む製品

は、BPPFV10NB、RS96010NB、RS9604NB、SSL10NB、SSL10NB2G、HS10NB、HS10NB2G、HS2410NB2Gです。

化学物質およびバイオハザードへの暴露に伴う危険を回避するために：

• 技能訓練を受けた検査実施担当者の管理下で、適切な設備のある検査室にて食中毒菌検査を行ってください。培養済み増菌

ブロスおよび培養済み増菌ブロスと接触する機器または接触面には、人体に有害となりうる量の病原体が含まれている可能

性があります。

• 試薬および汚染された検体を取り扱う際は、適切な保護衣、保護メガネの装着など、標準的な検査室の安全手順に常に従って

ください。

• 増菌後のブロスや、増幅後の試薬チューブ内容物には触れないでください。

• 現行の地方／地域／国の規制基準に従って、増菌された検体を廃棄してください。

• アッセイのライシスステップ中に適切な熱処理を行っていない検体は、潜在的バイオハザードと考えられる可能性があります

ので、3M分子検出装置内には入れないでください。

アッセイ準備中の交差汚染に伴う危険を回避するために：

• 手袋を必ず着用してください（ユーザー保護と遺伝子の混入を避けるため）。

高温の液体への暴露に伴う危険を回避するために：

• ヒーターの温度設定を推奨温度以上にしないでください。

• 推奨される加熱時間を超えないでください。

• 適切な較正済みの温度計を使用して、3M™分子検出ヒートブロックインサートの温度を確認してください（例：浸線付温度計

またはデジタル熱電対温度計。全浸没温度計は使用しないこと）。温度計は、必ず3M分子検出ヒートブロックインサートの指

定の部位に設置してください。

注記

アッセイ準備中の交差汚染に伴う危険を回避するために：

• 試薬ペレットを水和する前に、手袋を交換してください。

• 滅菌済みのエアロゾルバリア材（フィルター付）、分子生物学グレードのピペットチップの使用を推奨します。

• 検体ごとに新しいピペットチップを使用してください。

• GLP（医薬品安全性試験実施基準）に従って検体を増菌ブロスからライシスチューブに移してください。ピペットの汚染を回避

するため、中間的な滴下ステップを追加することもできます。例えば、増菌された各検体を滅菌チューブに滴下することができ

ます。

• 利用可能な場合は、殺菌灯が装備された病原菌取扱エリアを使用してください。

• 検査室の作業台および備品（ピペット、キャップ／デキャップツール等）は、水で1～5%（v/v）に希釈した家庭用漂白液または

DNA除去用液を使用して定期的に除染してください。

偽陽性の結果に伴う危険を回避するために：

• 増幅後の試薬チューブは絶対に開けないでください。

• 汚染されたチューブは、常に、水で1～5%（v/v）に希釈したの家庭用漂白液に1時間浸漬した後、アッセイの準備作業領域から

隔離して、廃棄してください。

• 増幅後の試薬チューブは絶対にオートクレーブで加熱滅菌処理しないください。

廃棄に関する詳細および行政の規制については、安全データシートをご参照ください。

（日本語）

JA

179

具体的な用途や手順についてご質問がありましたら、当社のウェブサイト（www.3M.com/foodsafety）をご覧いただくか、3M販売

担当者または取り扱い販売店までお問い合わせください。

お客様の使用責任

お客様には、使用前に製品説明書および製品情報を熟知していただく責任があります。詳細につきましては、当社ウェブサイト

www.3M.com/foodsafetyをご覧いただくか、担当の3M販売担当者または販売店にお問い合わせください。

検査方法を選択する際には、採取方法、検査プロトコル、検体の準備、取り扱い、検査手技、検体自体などの外的要因が結果に影

響することを認識することが重要です。

検査方法または製品を選択する際に、適切なマトリックスおよび微生物負荷を用いて十分数の検体を評価して、選択した試験方法

がお客様の基準を満たすことをお客様の責任でご確認ください。

また、検査方法および結果が顧客または供給業者の要件を満たしているかについても、事前にお客様の責任でご確認ください。

どの検査方法を使用した場合でも、3M食品衛生製品を用いて得られた結果は、検査を実施した食品マトリックスまたは工程の品

質を保証するものではありません。

各種食品マトリックスの検査方法の評価にご利用いただくため、3Mでは3M™分子検出マトリックスコントロール病原菌検出シス

テム用をご用意しました。必要に応じて、3M分子検出基質コントロール（MC）を使用し、対象マトリックスが3M分子検出アッセイ

2 -

カンピロバクター

の検査結果に影響を及ぼすかどうかを判定してください。3Mの検査法を採用する場合、または新規や由来の

不明なマトリックス、あるいは原材料を加工したマトリックスや加工工程が変更されたマトリックスを検査する場合は、検証期間中

に、マトリックスの標準となる複数の検体（由来の異なる検体）を検査してください。

マトリックスは、成分や加工状態など固有の特性を備える製品の種類として定義されます。マトリックス間の違いは、加工や外観

（例：未加工か滅菌済みか、新鮮か乾物か、等）の違いに起因する効果と同じように単純な場合があります。

保証の範囲／賠償の制限

個々の製品パッケージの限定保証条項に明示されている場合を除き、3Mは明示または黙示を問わず、商品性または特定の目的

への適合性に関する保証を含むがこれに限定されない、いかなる種類の保証も負いかねます。3M食品衛生製品部門の製品に欠

陥があった場合、3Mまたは指定販売店で交換あるいは製品購入価格の払い戻しをいたします。対応は上記のみとさせていただき

ます。製品の欠陥が疑われる場合は、判明した時点から60日以内に速やかに3Mに通知し、製品を3Mに返品する必要があります。

返品可否についてはカスタマーサービス（米国内は1-800-328-1671）にお電話にてご連絡いただくか、担当の公式3M食品安全性

販売員までお問い合わせください。

3Mの保証責任範囲

3Mは、直接的、間接的、特殊なもの、偶発的または必然的であるかを問わず、利益損失を含むがこれに限定されないあらゆる損失

または損害に対しての責任を負わないものとします。いかなる場合も、いかなる法的理論の下でも、3Mの保証責任範囲は、欠陥と

申し立てられた製品の購入金額を超えないものとします。

保管と廃棄

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は2～8°C（35～47°F）で保管してください。冷凍しないでください。暗所で保管してくださ

い。キット開封後は、ホイルパウチが破損していないことを確認してください。パウチが破損している場合は、使用しないでください。

開封後、使用しない試薬チューブは、凍結乾燥試薬の安定性を保つため、乾燥剤と共に再密閉可能なパウチ内に必ず保管してくだ

さい。封をしたパウチは2～8°C（35～47°F）で、90日間保管できます。

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は使用期限までに必ず使用してください。使用期限とロット番号は箱の外側のラベルに

記載しています。使用後、増菌ブロスおよび3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

には病原性の物質が含まれている可能性が

あります。検査終了後は、汚染廃棄物に関する現行の業界基準に従って廃棄してください。廃棄に関する詳細および行政の規制に

ついては、安全データシートをご参照ください。

使用方法

すべての指示に、注意深く従ってください。従わない場合、正確な結果が得られないことがあります。

検査室の作業台および備品（ピペット、キャップ／デキャップツール等）は、水で1～5%（v/v）に希釈したの家庭用漂白液または

DNA除去用液を使用して定期的に除染してください。

ユーザーは、「3M分子検出システムの設置資格（IQ）／操作資格（OQ）プロトコルと手順」

（6）

に記載のとおり、3M分子検出システム

のオペレーター資格（OQ）トレーニングを受講する必要があります。

ブロスの調製

製品情報に従って3M™

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス（CE250）を調製してください。使用前にブロスをオートクレーブで加熱

滅菌処理しないでください。調製済みブロスは調製後24時間以内に使用してください。調製後すぐに使用しない場合は、調整済み

ブロスを2～8°C

（7）

で遮光して保管してください。使用前に必ずブロスを20～30°Cに戻してください。

（日本語）

JA

180

検体の採取

3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスは、鶏肉（家禽肉）の洗浄や輸送ブロスには使用しないでください。所定の検体採取手順

に従って検体を採取し、輸送してください。

検体の増菌

表2には、食品および環境検体を増菌する場合の一般的なガイドラインを示しています。

この検査法がお客様の基準に合致するかを確かめるため、別の採取プロトコルまたは希釈率で事前確認いただき、お客様の責任

で使用の可否をご判断ください。

検体調製

a. 丸鶏の洗浄水、生の鶏肉（一部）の洗浄水

1. 内臓を抜いた生の丸鶏を緩衝ペプトン水（BPW）400 mLで1分間洗浄します。生の鶏肉（一部）を洗浄する場合は、

1.8～2 kg（4ポンド ± 10％）の部位をBPW

(1,8)

400 mLで洗浄してください。

2. 丸鶏や生の鶏肉（一部）の場合は、検体バッグ

(8)

内に余分な処理液が入らないよう、検体の洗浄前に余分な水気を切るよ

うにしてください。

3. 塩化セチルピリジニウム（CPC）で処理した鶏肉については、1 Lあたり5 mLのポリソルベート80（IUPAC：ポリオキシエチレ

ン（20）ソルビタンモノオレエート、CAS 9005-65-6）を調製済みの3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスに添加する必要

があります。ポリソルベート80は、溶解促進を目的として滅菌前に水に添加したり、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロ

スの調製前に滅菌水に直接添加したりすることもできます。

4. 洗浄水30 ｍLを無菌的に滅菌バッグに移し、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス30 mLを添加してください。

b. 丸鶏の洗浄用スポンジ

1. 検体

(1)

採取前に、スポンジにBPWを最大25 mLまで浸み込ませておく必要があります。検体を輸送する場合は、バッグを巻

くようにして畳み、2～8°Cで保管するようにしてください。

2. 丸鶏からスワブまたはスポンジで検体を収集します。

3. スワブを滅菌バッグに入れ、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス25 mLを添加します。スワブまたはスポンジが増菌ブ

ロスで覆われていることを確認します。

c. 生の鶏肉製品

1. 検体325 ± 32.5 gを無菌的に秤量し、滅菌バッグに入れます。BPW 1625 ± 32.5 mLを生の鶏肉製品に添加します。塊を

分散させるために、手で短時間揉んでよく混合します。

2. 混合後、生の鶏肉製品の混合液30 mLを滅菌バッグに加え、次いで3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス30 mLを加えて

よく混合します。

d. 生肉、調理済み食肉製品

1. 検体25 gを無菌的に秤量し、滅菌バッグに入れます。検体が採取しやすいように、フィルターバッグを推奨します。

2. 3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス225 mLを添加します。

3. 手で揉んで塊を崩します。混合する際に気泡が出ないようにします。ストマッキングやブレンダーを使用してバッグを処理し

ないでください。

e. 一次生産現場のブーツ拭き取り検体

1. 所定の検体採取手順に従って、ブーツ拭き取り検体を採取するか、靴下から検体を採取します。

2. 靴下を片方だけ滅菌バッグに入れ、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス100 mLを添加します。

f. 牽引スワブ

1. 所定の検体採取手順に従って、あらかじめ湿らせたスワブで検体を採取します。

2. スワブを滅菌バッグに入れ、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロス100 mLを添加します。

増菌ブロスの培養

1. バッグを巻くようにして畳み、上部に余分な隙間がないように空気を抜きます。約10 ± 2秒間、バッグを静かに揉みます。ストマ

ッキングやブレンダーを使用してバッグを処理しないでください。また、混合する際に気泡が出ないようにしてください。

2. バッグを41.5 ± 1°Cで好気培養します。適切な培養時間については表2を参照してください。

警告：アリルスルホン酸複合体をスポンジの水和溶液として含む中和バッファーの使用を選択する場合には、汚染された製品の

出庫につながる偽陰性の伴うリスクを回避するために、検査を行う前に増菌環境検体の1：2の希釈液（検体1に対し滅菌増菌ブ

ロス1）を行う必要があります。別の方法としては、中和緩衝液増菌ブロス10 μLを3Mライシスチューブに滴下します。

この検査法がお客様の基準に合致するかを確かめるため、別の採取プロトコルまたは希釈率で事前確認いただき、お客様の責任

で使用の可否をご判断ください。

（日本語）

JA

181

表2.一般的な増菌プロトコル。

検体マトリックス検体量 3M

カンピロバク

ター

属菌用増菌

ブロス

（mL）

（b）

増菌温度

（± 1°C）

増菌時間（時

間）

検体の分析量

（μL）

（c）

• 丸鶏の洗浄水

（a）

• 部位肉の洗浄水

（a）

BPW中洗浄水30 mL 30 41.5 22～26 20

• 丸鶏の洗浄用スポン

ジ

（a）

最大25 mLのBPWであらかじめ

湿らせたスポンジ1個

25 41.5 22～26 20

• 生肉

• 調理済み食肉製品

25 g 225 41.5 24～28 20

• 一次生産現場から採

取したブーツ拭き取

り検体

ブーツ拭き取り検体（スワブ）1 本 100 41.5 22～26 20

• 一次生産現場から採

取した牽引スワブ

あらかじめ湿らせたスワブ1本 100 41.5 22～26 20

(a) 鶏肉が塩化セチルピリジニウム（CPC）で処理されている場合は、1 Lあたり5 mLのポリソルベート80（IUPAC：ポリオキシエチ

レン（20）ソルビタンモノオレエート、CAS 9005-65-6）を調製済みの3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスに添加する必要が

あります。ポリソルベート80を、滅菌前に水に添加するか、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスの調製前に滅菌水に添加す

ることができます。

(b) 3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスは、調製から24時間以内に使用する必要があります。使用前に、ブロスを周囲温度

（25～30°C）に戻してください。

(c) 分析用の増菌検体を採取する前に、バッグの底を静かに揉みます。検体採取後、増菌ブロスが空気に触れないよう、バッグを

巻くようにして畳みます。再検査や確認手順で検体の追加が必要になる場合があります。

バリデートされた方法に関する具体的な指示

AOAC® Performance Tested

SM

(PTM) 認証#111803

AOAC Research Institute PTM

SM

の試験において、3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

は、

カンピロバクター

属菌の検出に

有効な方法であることが確認されています。上記試験において検査の対象となったマトリックスを表3に掲載します。

（日本語）

JA

182

表3.AOAC PTM

SM

認証#111803に従う増菌プロトコル。

検体マトリックス検体量 3M

カンピロバクター

属

菌用増菌ブロス（mL）

(c)

増菌温度

（± 1°C）

増菌時間

（時間）

検体の分析量

（μL）

（ｄ）

BPW 400 mLで洗浄した丸鶏

(a)(b)

BPW中洗浄水30 mL 30 41.5 22～26 20

BPW 400 mLで洗浄した

1.8 ～2 kgの丸鶏

(a)(b)

BPW中洗浄水30 mL 30 41.5 22～26 20

七面鳥と体

スポンジ

(a)(b)

最大25 mLのBPWであらか

じめ湿らせたスポンジ1個

25 41.5 24～26 20

BPW

(b)

1625 ± 32.5 mL

で洗浄した生の鶏ひき肉

（325 ± 32.5 g）

BPW中製品混合液30 mL 30 41.5 24～28 20

チキンナゲット 25 g 225 41.5 24～28 20

(a) 鶏肉が塩化セチルピリジニウム（CPC）で処理されている場合は、1 Lあたり5 mLのポリソルベート80（IUPAC：ポリオキシエチ

レン（20）ソルビタンモノオレエート、CAS 9005-65-6）を調製済みの3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスに添加する必要が

あります。ポリソルベート80を、滅菌前に水に添加するか、3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスの調製前に滅菌水に添加す

ることができます。

(b) または、このマトリックスを2X血液フリーボルトン増菌ブロス（BF-BEB）30 mLを用い、微好気条件で42 ± 1.0°Cにおいて

48 ± 2時間増菌することができます。3Mライシス溶液に検体20 µLを滴下します。

(c) 3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスは、調製から24時間以内に使用する必要があります。使用前に、ブロスを周囲温度

（25～30°C）に戻してください。

(d) 分析用の増菌検体を採取する前に、バッグの底を静かに揉みます。検体採取後、増菌ブロスが空気に触れないよう、バッグを

巻くようにして畳みます。再検査や確認手順で検体の追加が必要になる場合があります。

3M™分子検出スピードローダートレイの準備

1. 水で1～5%（v/v）に希釈したの家庭用漂白液で湿らせた布か使い捨て用タオルを使って、3M分子検出スピードローダートレイ

を拭きます。

2. 水で3M分子検出スピードローダートレイを濯ぎます。

3. 使い捨てペーパータオル等で、3M分子検出スピードローダートレイを拭きます。

4. 使用前に、3M分子検出スピードローダートレイが乾燥していることを確認してください。

3M™分子検出チルブロックインサートの準備

3M分子検出チルブロックインサートを作業台の上に直に置きます。3M分子検出チルブロックトレイは使用しません。ブロックは検

査室の室温（20～25°C）で使用します。

3M™分子検出ヒートブロックインサートブロックインサートの準備

3M分子検出ヒートブロックインサートをドライダブルブロックヒーターユニットに入れます。ドライブロックヒーターユニットをオン

にして、温度を100 ± 1°Cに設定します。3M分子検出ヒートブロックインサートブロックインサートが設定温度に達したら、温度を

保持します。

注：使用するヒーターユニットによっては、3M分子検出ヒートブロックインサートが設定温度に達するまでに約30分かかります。

適切な較正済みの温度計（例：浸線付温度計またはデジタル熱電対温度計。全浸没温度計は使用しないこと）を指定の部位に

設置し、3M分子検出ヒートブロックインサートが100 ± 1°Cであることを確認します。

3M™分子検出装置自動検出システム用の準備

1. 3M™病原菌自動検出ソフトウェアを起動してログインします。お使いのソフトウェアが最新バージョンであるかどうかを確認す

るには、3M食品衛生製品の営業担当者までお問い合わせください。

2. 3M分子検出装置の電源を入れます。

3. 各検体のデータを含む検出結果を作成、編集します。詳細については、3M分子検出システムユーザーマニュアルを参照してく

ださい。

注：3M分子検出装置自動検出システム用は、反応チューブと共に3M分子検出スピードローダートレイを入れる前に、待機状態

になっている必要があります。この加熱ステップには約20分かかり、装置のステータスバーがオレンジ色に点灯します。装置の準

備ができると、ステータスバーは緑色に変わります。

（日本語）

JA

183

ライシス

3M分子検出ヒートブロックインサートに入れる前に、ドライバーで3Mライシスチューブラックの底部を取り外します。

1. 3Mライシスチューブは、ラックに一晩（16～18時間）静置して、室温（20～25°C）に戻します。3Mライシスチューブを室温に戻す

別の方法としては、3Mライシスチューブを作業台の上に2時間以上静置するか、3Mライシスチューブを37 ± 1°Cの培養器内で

1時間保温するか、3Mライシスチューブをドライダブルブロックヒーターに入れて100°Cで30秒間加熱します。

2. キャップを閉めた状態のライシスチューブを反転させて中の液を混合させます。反転後4時間以内に次のステップに進みます。

3. 培養器から増菌済みブロスを取り出します。

3.1.1 検体を3Mライシスチューブに滴下する前に、増菌バッグの底を静かに揉みます。

3.1.2 再検査や確認手順で検体の追加が必要になる場合があります。検体採取後、バッグを巻くようにして畳み、余分な隙間

が出ないように空気を抜きます。推定結果の確認が必要な場合は、推定結果が出た直後に確認手順を進めてください。

4. 各検体およびNC検体（滅菌増菌ブロス）につき3Mライシスチューブ1本が必要です。

4.1 3Mライシスチューブのストリップは、必要なチューブ数分にカットすることができます。各チューブまたは8連チューブのスト

リップの数を選択してください。3 Mライシスチューブを空のラックに置きます。

4.2 交差汚染を回避するため、3Mライシスチューブのキャップは一度に1ストリップずつ外し、滴下ステップごとに新しいピペッ

トチップを使用してください。

4.3 以下に記載のとおり、増菌した検体を3Mライシスチューブに滴下します。

最初に、増菌した各検体を各3Mライシスチューブに滴下します。最後にNCを滴下します。

4.4 3M™分子検出キャップ／デキャップツール－溶解、3Mライシスチューブのキャップを一度に1ストリップずつ外します。

4.5 3Mライシスチューブのキャップを廃棄します。ライシス液を再検査用に保存する場合は、キャップを清潔な容器に入れてお

き、ライシス後に再度キャップを嵌めます。

4.5.1 保存した溶解物の処理については、付録Aを参照してください。

4.6 3Mライシスチューブに検体20 µLを滴下します。

5. 検査する検体数に応じて、ステップ4.4～4.6を繰り返します。

20 µl

6. すべての検体を移注したら、NC（ネガティヴコントロール用滅菌増菌ブロス、例：BPW）20 µLを3Mライシスチューブに滴下しま

す。水は陰性コントロールとして使用しないでください。

7. 3M分子検出ヒートブロックインサートの温度が100 ± 1°Cであることを確認してください。

8. 3M分子検出ヒートブロックインサート内にカバーを外した3Mライシスチューブラックを入れて、15 ± 1分間加熱します。加熱

中、3Mライシス液はピンク色（低温）から黄色（高温）に変色します。

8.1 アッセイのライシスステップ中に適切な熱処理を行っていない検体は、潜在的バイオハザードと考えられる可能性があり

ますので、3M分子検出装置自動検出装置内には入れないでください。

9. 3M分子検出装置ヒートブロックからカバーを外した3Mライシスチューブラックを取り出し、3M分子検出チルブロックインサー

ト内で5分間以上（最大10分間）冷却します。3M™分子検出チルブロックトレイを外して室温に戻された3M分子検出チルブロ

ックインサートは、作業台の上に直に置いてください。冷却されると、3Mライシス液はピンク色に戻ります。

10. 3M分子検出チルブロックインサートから3Mライシスチューブラックを取り出します。

（日本語）

JA

184

00:15:00

99-101ºC

20-25ºC

00:05:00

増幅

1. 各検体およびNCにつき3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブ1本が必要です。

1.1 チューブのストリップは、必要な数に合わせてカットできます。各3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブま

たは8連チューブのストリップの数を選択してください。

1.2 チューブを空のラックに置きます。

1.3 チューブの底の試薬ペレットを撹拌しないでください。

2. 3M試薬コントロールチューブを1本選択して、ラックに置きます。

3. 交差汚染を回避するため、3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブのキャップは一度に1ストリップずつ外し、滴

下ステップごとに新しいピペットチップを使用してください。

4. 下記のように、各溶菌液を、3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブおよび3M試薬コントロールチューブに滴

下してください。

3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

の各試薬チューブにまず各検体溶解物を滴下し、次にNCを滴下します。最後に3M試

薬コントロールチューブを水和します。

5. 3M™分子検出キャップ／デキャップツール－試薬用を使用して、3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブのキ

ャップを一度に 1ストリップずつ外します。キャップを廃棄します。

5.1 検液20 µLを3Mライシスチューブの液体の上部1/2（沈澱物は避けてください）から取り、対応する3M分子検出アッセイ

2 -

カンピロバクター

試薬チューブに分注します。ペレットが撹拌されないよう、一定の角度で分注します。ピペット操作で

5回静かに混合します。

5.2 個々の検体ライセートをストリップ内の対応する3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブに添加するまで、

ステップ5.1を繰り返します。

5.3 3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬チューブに同梱の予備キャップで蓋をし、3M分子検出キャップ／デキャッ

プツール－試薬用の丸い側を使用して前後に圧をかけ、キャップがしっかりと締めます。

5.4 検査する検体数について、ステップ5.1～5.3を繰り返します。

5.5 すべての検体ライシス液を滴下したら、ステップ5.1～5.3を繰り返してNCライシス液20 µLを3M分子検出アッセイ2 -

カン

ピロバクター

試薬チューブに滴下します。

5.6 3M試薬コントロールチューブにNC溶菌液20 µLを滴下します。ペレットが撹拌されないよう、一定の角度で分注します。

ピペット操作で5回静かに混合します。

6. 清潔な、殺菌済み3M分子検出スピードローダートレイにキャップをしたチューブを装填します。3M分子検出スピードローダー

トレイを閉めて、留めがねをかけます。

20 µL

7. 3M測定機器病原菌自動検出システム用ソフトウェアで設定した検査内容を確認します。

8. ソフトウェアのスタートボタンをクリックして、使用する装置を選択します。選択された装置の蓋が自動的に開きます。

9. 3M分子検出装置自動検出装置内に3M分子検出スピードローダートレイを置き、蓋を閉めてアッセイをスタートします。結果

は60分ほどで判定されますが、陽性の場合はもっと早く検出されます。

10. アッセイ終了後、3M分子検出スピードローダートレイを3M分子検出装置自動検出システム用から取り出し、チューブは水で

1～5%（v/v）に希釈した家庭用漂白液に1時間浸漬した後、アッセイの準備作業領域から隔離して、廃棄してください。

（日本語）

JA

185

注記：交差汚染による偽陽性の危険を最小限に抑えるため、増幅DNAの入った試薬チューブは絶対に開けないでください。これ

には、3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

試薬、3M試薬コントロール、3Mマトリックスコントロールチューブが含まれます。

汚染されたチューブは、常に、水で1～5%（v/v）に希釈したの家庭用漂白液に1時間浸漬した後、アッセイの準備作業領域から隔

離して、廃棄してください。

結果と解釈

アルゴリズムが核酸増幅の結果より得られた光出力曲線を解釈します。結果はソフトウェアが自動的に解析し、結果に応じて色分

けされます。陽性または陰性の結果は、それぞれが持つ固有の曲線パラメータを解析することにより特定されます。結果が陽性と

推定される場合はリアルタイムでレポートされますが、陰性およびInspect（検証が必要な結果）の場合は、その検査が完了した後

に表示されます。

陽性と推定される検体は、検査室の標準作業手順書、または適切な参照法

（1,2）

に従って確認する必要があります。まず、前培養した

3M

カンピロバクター

属菌用増菌ブロスによる一次増菌物を選択的

カンピロバクター

属菌用プレートに移し微好気条件で培養し、

適切な生化学的、顕微鏡的、血清学的手法を使用して単離菌を確認してください。増菌ブロスを最適な状態に維持するには、検体

採取後、増菌バッグを巻くようにして畳んでください。

注：陰性検体がシステムとして0を返さない場合でも、3M分子検出アッセイ2 -

カンピロバクター

増幅試薬は「バックグラウンド」

相対発光量（RLU）を持っています。

異常な光出力がみられるなどの稀なケースについては、アルゴリズムがこれを「再検査してください」と表示します。3M社はお客様

に、「再検査」検体に対して検査を再度行うことを推奨します。その結果が続けて再検査であった場合は、任意の別の方法または行

政の規制

（1,2）

によって指定されたとおりに確認検査を行ってください。

付録A. プロトコルの中断：加熱処理済み溶解物の保管と再検査

1. 加熱処理済み溶解物を保管するには、3Mライシスチューブに清潔なキャップを嵌めます（「ライシス」セクション、4.5を参照）。

2. 2～8°Cで最大72時間保管します。

3. 保管された検体を2～3回反転させて混合し、増幅用として準備します。

4. チューブのキャップを外します。

5. 混合したライシスチューブを3M分子検出ヒートブロックインサートに置き、100 ± 1°Cで5 ± 1分間加熱します。

6. 3M分子検出ヒートブロックから3Mライシスチューブラックを取り出し、3M分子検出チルブロックインサート内で5分間以上

（最大10分間）冷却します。

7. 上記の「増幅」セクションに詳述されているプロトコルを継続します。

参考文献：

1. Microbiology Laboratory Guidebook. U. S. Department of Agriculture (USDA) Food Safety and Inspection Service

(FSIS) Microbiology Laboratory guidebook 41.04. Isolation and identi󼴩cation of

Campylobacter jejuni/coli/lari

from

poultry rinse, sponge and raw product samples. August 1, 2016.

2. ISO 10272-1. Microbiology of the food chain - Horizontal method for detection and enumeration of

Campylobacter

spp

. Part 1. Detection method.

3. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice for

Nonclinical Laboratory Studies.

4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.

5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stu󼴨s - General rules for microbiological examination.

6. 3M Installation Quali󼴩cation (IQ) / Operational Quali󼴩cation (OQ) Protocols and Instructions for 3M Molecular

Detection System. Contact your 3M Food Safety representative to obtain a copy of this document.

7. ISO 11133. Microbiology of food, animal feed and water - Preparation, production, storage and performance testing

of culture media.

8. U. S. Department of Agriculture (USDA). Food Safety and Inspection Service (FSIS) Directive 10, 250.1.

Salmonella

and

Campylobacter

veri󼴩cation program for raw meat and poultry products. September 20, 2013.

記号の説明

www.3M.com/foodsafety/symbols

（日本語）

JA

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3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea 取扱説明書

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