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(Français)
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Instructions D’utilisation
Suivre attentivement toutes les instructions. Dans le cas contraire, les résultats obtenus risquent d'être inexacts.
Préparation de l'échantillon
1. Utiliser des diluants stériles appropriés:
Eau de dilution tamponnée au phosphate Buttereld
7
, eau peptonée à 0,1%
8
, diluants peptone-sel
8,9
, eau peptonée
tamponnée
8,9
, solution saline (0,85– 0,90%), bouillon de Letheen sans bisulte ou eau distillée. Se référer à la
section «Instructions spéciques pour méthodes validées» pour connaître les exigences spéciques.
Ne pas utiliser de diluants contenant du citrate, du bisulte ou du thiosulfate avec les Tests 3M Petrilm CC,
car ils peuvent inhiber la croissance. Si une solution tampon au citrate est indiquée dans la procédure standard, la
remplacer par l'un des tampons cités plus haut, réchaué à une température de 40 à 45°C (104 à 113°F).
2. Mélanger ou homogénéiser l'échantillon.
3. Pour obtenir des conditions de croissance et de recouvrement optimales des micro-organismes, ajuster le pH de
l'échantillon dilué entre 6,6 et 7,2. Pour les produits acides, ajuster le pH avec NaOH 1 N. Pour les produits alcalins,
ajuster le pH avec HCl 1 N.
Test
1. Placer le Test 3M Petrilm CC sur une surface de travail plane et régulière.
2. Soulever le lm supérieur et, en tenant la pipette perpendiculairement à la zone d'inoculation, déposer 1ml
d'échantillon dilué au centre du lm inférieur.
3. Recouvrir délicatement l'échantillon avec le lm supérieur pour éviter de piéger des bulles d'air.
4. Placer le 3M™ Petrilm™ Diuseur, face plane au contact du test, au centre du Test 3M Petrilm CC. Répartir
l'échantillon uniformément en exerçant une légère pression au centre du 3M Petrilm Diuseur. Répartir l'inoculum
sur la totalité de la zone de croissance du Test 3M Petrilm CC avant que le gel ne se forme. Ne pas faire glisser le
3M Petrilm Diuseur sur le lm.
5. Retirer le 3M Petrilm Diuseur et laisser le Test 3M Petrilm CC reposer pendant au moins une minute an de
laisser le gel se former.
Incubation
Laisser incuber les Tests 3M Petrilm CC à l’horizontale, avec le lm transparent vers le haut, en veillant à ne pas empiler
plus de 20tests. Plusieurs durées et températures d'incubation peuvent être utilisées en fonction des méthodes de référence
locales en vigueur. Certaines d'entre elles gurent dans la section «Instructions spéciques pour méthodes validées».
Interprétation
1. Le dénombrement à l'aide des Tests 3M Petrilm CC peut se faire sur un compteur de colonies standard ou au
moyen d'une autre source de lumière intense. Le gaz produit par une colonie de coliformes peut faire éclater la
colonie, plaçant celle-ci à la périphérie de la bulle. Compter dans ce cas une seule colonie de coliformes. Ne pas
compter les colonies présentes sur le pourtour en mousse, la sélectivité du milieu y est modiée. Ne pas tenir
compte des bulles artefacts qui étaient éventuellement présentes avant l'incubation.
L'interprétation des colonies de coliformes sur le Test 3M Petrilm CC varie selon la méthode de référence. Par exemple:
AOAC® Ocial Methods
SM
:
Les colonies de coliformes sont rouges et associées
à des bulles de gaz (situées à une distance inférieure
ou égale au diamètre de la colonie). Les colonies non
associées à des bulles de gaz (ou qui sont éloignées
des bulles d'une distance supérieure au diamètre de
la colonie) ne sont pas comptées comme coliformes.
OU Méthodes certiées NF Validation:
- Par comparaison à la méthode ISO4831
2
(méthode
NPP), les colonies de coliformes sont rouges et
étroitement associées à des bulles de gaz (situées à
une distance inférieure ou égale au diamètre de la
colonie).
- Par comparaison à la méthode ISO4832
1
(coliformes totaux) et à la méthode NFV08-060
3
(coliformes thermotolérants), toutes deux basées sur
la gélose VRBL: compter toutes les colonies rouges
avec ou sans bulles de gaz.
2. La zone de croissance circulaire est de 20cm
2
environ. Des estimations sont possibles sur les Tests 3M Petrilm CC
contenant plus de 150colonies en comptant le nombre de colonies dans un ou plusieurs carrés représentatifs et en
déterminant le nombre moyen par carré. Multiplier ce nombre moyen par 20 pour déterminer le nombre estimé par
Test 3M Petrilm CC.
3. Lorsque le nombre de colonies est élevé, les Tests 3M Petrilm CC pourront présenter une coloration du gel plus
accentuée et l'une des caractéristiques suivantes, voire les deux: grand nombre de petites colonies indiscernables
et/ou grand nombre de bulles de gaz. Des concentrations importantes de coliformes entraîneront une coloration
rouge foncé de la zone de croissance. Lorsque l'un de ces phénomènes se produit, enregistrer le résultat comme
incomptable. Lorsqu'un dénombrement plus précis est requis, recommencer l'analyse sur des dilutions plus élevées
de l'échantillon.