Thermo Fisher Scientific QuantStudio 1 Plus Real-Time PCR System ユーザーガイド

仅供研究使用。不适用于诊断过程。

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用和维护

出版编号 MAN0025045

修订版 A.0

赛默飞世尔（上海）仪器有限公司 | 中国（上海）自由贸易试验区秦桥路 211 号 T71-6 幢

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译自出版物编号 MAN0024786 修订版 A.0 的英文版。

修订历史: 出版物编号 MAN0024786

版本日期描述

A.0 2021 年4月8日QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System 的新文档。

重要许可信息: 本产品可能包含在一个或多个有限使用标签许可证的范围内。使用本产品，表示接受所有适用的限制使用标签许可证

的条款和条件。

除非另外指明，所有商标均归 Thermo Fisher Scientiﬁc 及其子公司所有。TaqMan 为 Roche Molecular Systems, Inc. 的注册商标，经许

可和授权而使用。 Cy 是 GE Healthcare 的注册商标。Microsoft 和 Windows 是 Microsoft Corporation 的商标。Pentium 是 Intel

Corporation 的注册商标。Google 和 Chrome 是 Google, Inc. 的商标。

关于本指南 ................................................................. 9

■第 1 章产品信息 .................................................................... 10

仪器硬件描述 .................................................................. 10

仪器概述 .................................................................. 10

仪器的部件 ................................................................ 12

主屏幕部分 ................................................................ 13

软件描述 ...................................................................... 15

仪器、桌面和 Thermo Fisher™ Connect 软件的功能 ............................ 15

文件夹、模板、实验和项目 .................................................. 16

第三方软件 ................................................................ 17

获支持的仪器和计算机连接选项 .................................................. 17

实验类型 ...................................................................... 18

■第 2 章操作仪器的一般程序 ....................................................... 21

使用注意事项 .................................................................. 21

打开仪器电源 .................................................................. 22

关闭仪器 ...................................................................... 22

登录 .......................................................................... 22

退出 .......................................................................... 22

在 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR Instrument 中加载和卸载反应板 .............. 23

传输、查看或管理文件和结果 .................................................... 24

从仪器主屏幕导出 EDS 文件 ................................................ 24

查看运行记录以及从仪器删除或导出文件 ...................................... 24

管理模板（EDT 文件） ..................................................... 24

■第 3 章配置仪器并管理仪器账户 ................................................. 26

首次启动 ...................................................................... 26

安装和仪器验证 ................................................................ 27

不登录使用仪器 ................................................................ 27

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

3

在初始启动时创建管理员仪器账户 ................................................ 27

创建新的仪器账户 .............................................................. 28

Settings（设置）概述 .......................................................... 28

管理仪器设置 .................................................................. 31

管理仪器名称（仅限管理员） ................................................ 31

启用节电模式 ............................................................. 32

设置热盖的闲置温度 ........................................................ 32

设置网络磁盘 .............................................................. 32

仅 OEM 连接（仅限管理员） ................................................ 32

为 Thermo Fisher™ Connect 选择区域（仅限管理员） .......................... 32

设置日期和时间（仅限管理员） .............................................. 33

设置网络连接 .............................................................. 33

恢复出厂默认设置 .......................................................... 34

选择语言 .................................................................. 34

了解仪器 ...................................................................... 34

查看仪器规格 .............................................................. 35

查看和导出许可协议 ........................................................ 35

管理主屏幕通知 ................................................................ 35

管理维护、服务及校准 .......................................................... 35

更新仪器软件（仅限管理员） ................................................ 36

启用远程仪器监控（仅限管理员） ............................................ 36

查看仪器统计信息 .......................................................... 36

查看仪器日志 .............................................................. 36

用户管理 ...................................................................... 37

需要仪器账户登录（仅限管理员） ............................................ 37

管理退出计时器（仅限管理员） .............................................. 37

管理仪器账户 .............................................................. 37

将仪器账户链接至 Thermo Fisher™ Connect ....................................... 38

将现有仪器账户链接至 Thermo Fisher™ Connect .............................. 38

创建仪器账户并链接至 Thermo Fisher™ Connect .............................. 39

4QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

■第 4 章在仪器上创建并运行实验 ................................................. 40

工作流程 ...................................................................... 40

运行实验 ...................................................................... 41

从模板创建和运行实验 ...................................................... 41

从已存文件运行实验 ........................................................ 41

重复上一次仪器运行 ........................................................ 42

在开始运行之前编辑实验 ........................................................ 43

输入或编辑模板属性 ........................................................ 43

编辑运行条件 .............................................................. 44

定义、分配和查看反应孔细节 ................................................ 47

查看、暂停或停止运行 .......................................................... 48

在仪器触摸屏上查看实时数据和图谱 .......................................... 48

在仪器触摸屏上调整实时图谱的显示 .......................................... 48

暂停或停止仪器运行 ........................................................ 48

运行期间锁定触摸屏 ........................................................ 49

从仪器主屏幕导出 EDS 文件 ..................................................... 49

■第 5 章校准并验证仪器性能 ....................................................... 50

校准和验证时间表 .............................................................. 50

校准描述 ...................................................................... 51

查看校准状态并设置提醒 ........................................................ 51

在仪器中查看校准状态并设置提醒 ............................................ 51

在 Thermo Fisher™ Connect 中查看校准状态并设置提醒 ........................ 52

执行 ROI/均一性、背景和染料校准 ............................................... 53

工作流程：校准 ............................................................ 53

准备校准反应板 ............................................................ 53

进行校正 .................................................................. 54

查看校准图像并将结果传输到 USB ........................................... 55

校准失败故障排除 .......................................................... 56

识别污染 .................................................................. 57

创建背景反应板

（可选）

.................................................... 57

使用 RNase P 反应板进行仪器验证 ............................................... 58

仪器验证描述 .............................................................. 58

RNase P 仪器验证反应板 ................................................... 59

性能规范通过标准 .......................................................... 59

准备 Rnase P 反应板 ....................................................... 59

执行 RNase P 验证 ......................................................... 60

验证失败排除故障 .......................................................... 62

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

5

添加自定义染料 ................................................................ 63

自定义染料概述 ............................................................ 63

使用稀释系列确定最佳的自定义染料浓度 ...................................... 63

校准自定义染料 ............................................................ 65

自定义熔解曲线实验校准 ........................................................ 68

■第 6 章维护仪器 .................................................................... 70

备份或还原仪器 ................................................................ 70

样本模块消毒 .................................................................. 71

所需材料 .................................................................. 71

清洁样品区块 .............................................................. 71

清洁样本模块的详细步骤 .................................................... 72

更换仪器保险丝 ................................................................ 73

所需材料 .................................................................. 73

更换保险丝 ................................................................ 74

准备存储、移动或运输仪器 ...................................................... 74

移动仪器 .................................................................. 75

仪器送修服务 .............................................................. 75

■附录 A 安装仪器并连接到网络 ..................................................... 77

工作流程：安装并连接到网络 .................................................... 77

开始前 ........................................................................ 78

仪器和计算机连接 .............................................................. 78

拆开包装并安装仪器 ............................................................ 79

打开电源并按照启动向导进行操作 ................................................ 80

将仪器和计算机直接连接或连接到 LAN ........................................... 80

联网 .......................................................................... 81

获支持的仪器和计算机连接选项 .............................................. 82

控制和监控联网仪器 ........................................................ 83

以太网端口概述 ............................................................ 83

必须打开的防火墙端口 ...................................................... 83

联网指南和最佳方法 ........................................................ 83

6QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

■附录 B 故障排除 .................................................................... 84

■附录 C 仪器规格和布局 ............................................................ 86

配置后系统尺寸 ................................................................ 87

仪器间距 .................................................................. 88

电气要求 ...................................................................... 88

环境要求 ...................................................................... 88

网络要求 ...................................................................... 89

■附录 D 部件和材料 ................................................................. 90

试剂盒、耗材、附件和试剂 ...................................................... 90

耗材（96 孔、0.2 mL 格式） .................................................... 90

附件 .......................................................................... 91

通用材料和耗材 ................................................................ 91

■附录 E 安全性 ....................................................................... 93

本仪器上的符号 ................................................................ 93

合格符号 .................................................................. 94

本仪器上的安全警示 ............................................................ 94

本仪器上安全标签的位置 .................................................... 95

非 Thermo Fisher Scientiﬁc 生产的仪器的安全信息 Thermo Fisher Scientiﬁc ........... 96

仪器安全性 .................................................................... 96

常规 ...................................................................... 96

人身伤害 .................................................................. 96

电气安全 .................................................................. 96

清洁和去污 ................................................................ 97

安全性和电磁兼容性 (EMC) 标准 ................................................. 97

安全性合规 ................................................................ 97

电磁兼容性 (EMC) .......................................................... 98

环境设计 .................................................................. 98

化学品安全 .................................................................... 99

生物危害安全性 ................................................................ 99

■附录 F 文档和支持 ................................................................ 100

相关文档 ..................................................................... 100

客户和技术支持 ............................................................... 100

有限产品保修 ................................................................. 100

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

7

索引 ...................................................................................... 101

8QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

关于本指南

本指南提供有关安装、使用和维护 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System 的信息。有关在此系统

上执行实验的信息和说明，请参阅 QuantStudio™ Design and Analysis SC Software v1.0

用户指南

（出版

物编号 MAN0025046）。

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

9

产品信息

■仪器硬件描述 ........................................................................ 10

■软件描述 ............................................................................ 15

■获支持的仪器和计算机连接选项 ........................................................ 17

■实验类型 ............................................................................ 18

仪器硬件描述

仪器概述

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System 使用基于荧光的聚合酶链反应 (PCR) 试剂执行以下类型的

实验：

•目标核苷酸序列（靶基因）定量检测

•靶基因定性检测

•PCR 产物定性分析

有关详情，请参阅 “实验类型” ，第 18 页。

仪器已配置 96 孔0.2 mL 固定加热块和 4色耦合滤光片组。

仪器可以直接从触摸屏运行，以创建和开始实验。要设计实验或分析数据，可以在仪器上使用

QuantStudio™ Design and Analysis SC Software v1.0。

仪器可以与 Thermo Fisher™ Connect Platform 配套使用。

可选的条形码扫描器和可选的无线适配器均可单独订购。

1

10 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

仪器滤光片和支持的染料

系统染料

仪器使用耦合的四色滤光片组，支持下表和图中所示的染料。有关可用光谱染料校准试剂盒的更多信息，

请联系售后服务。

表 1 滤光片和获支持的染料

峰值滤光片颜色

滤光片波长[1]

工厂校准染料自定义染料示例

激发发射

x1-m1 蓝色 470 ± 15 nm 520 ± 15 nm FAM™ 染料、SYBR™

Green SYT09

x2-m2 绿色 520 ± 10 nm 558 ± 12 nm VIC™ 染料 JOE™ 染料、

HEX™ 染料、TET™ 染料[2]

x4-m4 橙色 580 ± 10 nm 623 ± 14 nm ROX™ 染料、JUN™ 染

料Texas Red™ 染料

x5-m5 红色 640 ± 10 nm 682 ± 14 nm MUSTANG PURPLE™

染料、Cy®5LIZ™ 染料

[1] 中心波长是经过优化的波长。

[2] Thermo Fisher Scientific 的 HEX™ 和 TET™ 染料的波长落在系统的发射波长范围内，因此可添加并在仪器上使用。

滤光片

波长

(nm)

1234

x1-m1 x2-m2 x4-m4 x5-m5

发射

光谱

1x1-m1—FAM™ 染料、SYBR GREEN™ 染料

2x2-m2—VIC™ 染料

3x4-m4—JUN™ 染料、ROX™ 染料、Texas Red™ 染料

4x5-m5—Cy® 5、MUSTANG PURPLE™ 染料

自定义染料

仪器可运行使用自定义染料设计的测定。自定义染料包括以下染料：

•非 Thermo Fisher Scientiﬁc 提供的染料。

•非仪器系统染料的染料或染料配方。

要在仪器上使用自定义染料，请查看以下要求：

•校准仪器以使用自定义染料（请参阅 “添加自定义染料” ，第 63 页）。

•确保自定义染料在滤光片的波长范围内激发和发射（请参阅表 1 ，第 11 页）。

•选择与运行中使用的其他染料不重叠的自定义染料（请参阅表 1 ，第 11 页）。

第 1 章产品信息

仪器硬件描述

1

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

11

仪器的部件

1

2

3

1触摸屏—控制仪器。

2USB 端口—用于连接外部网络驱动器或外部数据存储设备。

3仪器抽屉—放置样品反应板。

仪器背面有三个额外的 USB 端口。

注释: 仪器一次只能识别一个外部存储设备进行数据传输。

第 1 章产品信息

仪器硬件描述

1

12 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

主屏幕部分

96

1 2

3

8 7

5

4

1仪器名称

2帮助图标

3抽屉状态

4状态拨盘

5当前用户名和仪器模块类型

6Settings（设置）按钮

7用于访问实验模板文件 (EDT) 的按钮

8连接图标

9Sign In（登录）（或 My Proﬁle（我的账户））按钮

表 2 主屏幕部分

主屏幕部分功能更多信息

仪器名称由管理员设置，作为仪器的唯一性标识。 “管理仪器名称（仅限管理员）” ，

第 31 页

帮助图标点击以启动触摸屏帮助系统，访问分步说明。 —

抽屉状态 • — 抽屉已锁定。在实验运行、校准运行和自我验

证检测运行期间，抽屉锁定。运行完成后，抽屉会自

动解锁。

• — 抽屉已解锁。

•Drawer is open（抽屉开启） — 抽屉开启。抽屉关

闭时不显示任何消息。

—

第 1 章产品信息

仪器硬件描述

1

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

13

表 2 主屏幕部分

（续）

主屏幕部分功能更多信息

状态拨盘 •仪器使用时 — 显示样本模块温度、已运行时间和运

行状态。

您可以向左滑动拨盘或点击以访问运行的实时视

图。

•仪器未使用时 — 显示 Set up run（设置运行）。您

可以通过点击状态拨盘启动运行。

—

当前用户名和模块

类型

显示当前登录用户的用户名和仪器模块类型。

注释: 如果无用户登录，则仪器默认为 Guest（访客）账

户。

—

Settings（设

置）按钮

点击 Settings（设置）以配置、校准或了解仪器。第 3 章, “配置仪器并管理仪器账户”

用于访问实验和模

板文件的按钮

Load Experiment（加载实验） — 点击以从 Thermo

Fisher™ Connect 账户、USB、仪器文件夹或网络驱动器

打开用户创建的 EDT 文件。

“从已存文件运行实验” ，第 41 页 .

Open Template（打开模板） — 点击以打开系统 EDT

模板文件。

“从模板创建和运行实验” ，第 41 页

“从已存文件运行实验” ，第 41 页

Run Last（上一次运行） — 点击以打开仪器上一次运行

的 EDT 文件。

•如果您已登录，则打开的文件将是您在登录时最后一

次运行的文件。

•如果您未登录，则打开的文件将是访客账户最后一次

运行的文件。

“重复上一次仪器运行” ，第 42 页

连接图标 • — 仪器已连接到有线网络。

• — 仪器已连接无线网络。

• — USB 驱动器已插入仪器。

• — 仪器已链接至 Thermo Fisher™ Connect 账

户。

—

Sign In（登录）

按钮

（用户登录时的

My Proﬁle（我的

账户）按钮）

•点击 Sign In（登录）可登录仪器账户并链接至

Thermo Fisher™ Connect 账户。

•点击 My Proﬁle（我的账户）可更改仪器账户设

置，链接至 Thermo Fisher™ Connect 账户，或在运

行期间锁定仪器。

“登录” ，第 22 页

第 1 章产品信息

仪器硬件描述

1

14 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

软件描述

仪器、桌面和 Thermo Fisher™ Connect 软件的功能

仪器和软件（桌面和 Thermo Fisher™ Connect）包括下表中描述的功能。

软件功能仪器桌面 Thermo Fisher

™ Connect

作为访客使用（无需登录） ✓✓—

创建模板（已解锁或锁定） —✓ ✓

编辑解锁模板 ✓✓✓

编辑锁定模板（需要模板创建者指定的密码） —✓ ✓

将系统或用户创建的模板（EDT 文件）加载到仪

器

✓✓—

更改仪器上加载模板（EDT 文件）的实验设置

可在锁定模板中更改的设置（无需密码）：

•属性：所有设置

•运行条件：不允许更改

•反应板：样本名称

可在未解锁模板中更改的设置：

•属性：所有设置

•运行条件：所有设置

•反应板：样本名称

✓— —

在仪器中装载反应板 ✓— —

开始运行 ✓✓—

查看运行期间的实时数据 ✓✓✓

查看仪器状态（正在运行、需要校准等） ✓—✓

分析结果 —✓ ✓

设置校准提醒 ✓—✓

查看导出的校准或 RNase P 验证结果 —✓ ✓

（

仅限

RNase

P）

第 1 章产品信息

软件描述

1

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

15

文件夹、模板、实验和项目

术语定义支持位置

加载实验中的文件夹可在仪器上存储模板（EDT 文件）的位置：

•My Instrument（我的仪器） – 如果您已登录，则显示

•Public（公共） – 存储由访客用户运行的所有实验的位置

•USB – USB 用于手动传输到计算机或从计算机传输

•Post Read（读后） – 如果您运行终点实验，预读实验将

自动保存在此文件夹中以进行读后分析

仪器

实验模板文件 (EDT) 可在仪器运行之前修改仪器运行的默认设置。

两种类型：

•工厂提供，可从 Open Template（打开模板）（仪器）或

Create Experiment（创建实验）（桌面或 Thermo

Fisher™ Connect）访问

•用户创建，从 Load Experiment（加载实验）访问

仪器

桌面

Thermo Fisher™

Connect

实验运行文件 (EDS) 已完成仪器运行的设置和数据。仪器

桌面

Thermo Fisher™

Connect

项目云端数据管理器中用于二次分析应用程序的功能。不适用于

Thermo Fisher™ Connect 软件，它是一个初步分析应用程序。

Thermo Fisher™

Connect

模板和实验组件仪器桌面 Thermo Fisher™ Connect

属性 •实验文件名

•试剂信息（试剂条形码，批

号）

•反应板条形码

•数据目标位置（自动传输数据

的位置）

•备注（此时不使用的标签）

•实验文件名

•反应板条形码

•用户名

•仪器类型

•模块类型

•实验类型

•化学（试剂信息）

•运行模式

•备注

•（仅限 Thermo Fisher™ Connect）通知

运行条件热循环条件热循环条件

反应板样本名称

您无法在仪器上编辑靶基因/SNP 测

定或任务。

在 Plate（反应板）选项卡的 Quick Setup（快速设置）和

Advanced Setup（高级设置）窗格中定义和分配样本、靶

基因或 SNP 测定和任务。

第 1 章产品信息

软件描述

1

16 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

（续）

模板和实验组件仪器桌面 Thermo Fisher™ Connect

运行开始和监控正在进行的运行

查看：剩余时间和温度、运行条

件、图谱

暂停、继续、停止运行

开始和监控正在进行的运行

查看：剩余时间和温度、运行

条件、图谱

监控正在进行的运行（链接到

Thermo Fisher™ Connect

Instrument Details（仪器

详情））

查看：剩余时间和温度、运行

条件、图谱

结果不适用审查图谱

导出不适用导出结果

第三方软件

在运行 QuantStudio™ Design and Analysis SC Software v1.0 的计算机上安装第三方软件之前，确认第三

方软件不会：

•限制以太网通信。

•干扰仪器或计算机的操作。

获支持的仪器和计算机连接选项

我们支持以下直接、联网（LAN–局域网）或 Thermo Fisher™ Connect 配置。建议不要使用列出配置之外

的配置。选择满足您的实验室仪器、软件和工作流程要求的配置。

重要信息!

请勿

将以太网线缆和 Wi‑Fi 模块（目录号 A26774）

同时

连接到仪器。配置仪器同时进行有线

和无线连接可能会干扰仪器运行。

注释: 有关仪器联网的详细信息，请参阅 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System IT

检查清单

（出

版物编号 MAN0025575）。

直接配置选项

•Thermo Fisher Scientiﬁc 提供的带有 QuantStudio™ Design and Analysis SC Software v1.0 的计算机

•计算机到仪器的连接：

–使用以太网线缆在计算机和仪器之间进行直接有线连接

重要信息! 仪器与计算机的直接连接

不能

与 LAN 或 Thermo Fisher™ Connect 配

置结合使用。

联网配置选项

•Thermo Fisher Scientiﬁc 提供的带有 QuantStudio™ Design and Analysis SC Software v1.0 的计算机

•计算机和仪器必须具有在同一网络内的相同子网掩码。

第 1 章产品信息

获支持的仪器和计算机连接选项

1

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

17

（续）

联网配置选项

•计算机到 LAN 的连接

（选择一个选项）

：

–使用以太网线缆有线连接到网络 –

或

–

–无线连接到网络

LAN

•仪器到 LAN 的连接

（选择一个选项）

：

–使用以太网线缆有线连接到网络 –

或

–

–使用仪器 Wi‑Fi 模块无线连接到网络

Thermo Fisher™ Connect 配置选项

•使用接入互联网并且带有 Chrome™ 网络浏览器的计算机访问 Thermo Fisher™ Connect

•计算机到 Thermo Fisher™ Connect 的连接

（选择一个选项）

：

–使用以太网线缆有线连接到互联网 –

或

–

–无线连接到互联网

LAN

•仪器到 Thermo Fisher™ Connect 的连接

（选择一个选项）

：

–使用以太网线缆有线连接到网络 –

或

–

–使用仪器 Wi‑Fi 模块无线连接到网络

实验类型

目的描述

标准曲线实验

确定样本中靶基因的

绝对数量。

1. 软件测量标准稀释系列和测试样本中靶基因的扩增。

2. 软件使用标准稀释系列的数据生成标准曲线。

3. 软件使用标准曲线来分析测试样本中靶基因的绝对数量。

第 1 章产品信息

实验类型

1

18 QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

目的描述

相对标准曲线实验

确定样本中靶基因的

相对数量。

1. 软件测量标准稀释系列、参考（校准物）样本和测试样本中目标靶基因和内参靶基因的

扩增。

内源性对照是在所有样本中均表达的靶基因；内源性对照的例子有 β-肌动蛋白、GAPDH

和 18S 核糖体 RNA。软件可以通过算法将多个内源性对照靶基因纳入相对定量计算中。

参比样本被用作生成相对定量结果的基准样本（或 1 倍样本）。例如，在研究药物对基

因表达的影响时，未经处理的对照是合适的参比样本。

2. 软件使用相关标准稀释系列的数据生成相关靶基因和内参基因的标准曲线。

3. 软件使用标准曲线来分析每个样本中相关靶基因和内参基因的数量。然后以样本的内参

基因的数量为基准，对各个样本中靶基因的数量进行校准。

4. 要测定测试样本中靶基因的相对数量，软件用样本中校准后的靶基因数量除以参比样本

中校准后的靶基因数量。

比较 CT (DDCt 实验

确定样本中靶基因的

相对数量。

1. 软件测量参考（校准物）样本和测试样本中目标靶基因和内参基因的扩增。

内源性对照是在所有样本中均表达的靶基因；内源性对照的例子有 β-肌动蛋白、GAPDH

和 18S 核糖体 RNA。软件可以通过算法将多个内源性对照靶基因纳入相对定量计算中。

参比样本被用作生成相对定量结果的基准样本（或 1 倍样本）。例如，在研究药物对基

因表达的影响时，未经处理的对照是合适的参比样本。

2. 以内参基因为基准，对目标靶基因进行校准。

3. 要测定测试样本中靶基因的相对数量，软件将样本中校准后的 Δcqq（Δctt 或 ΔCrt）与参

比样本中校准后的 ΔCq（ΔCt 或 ΔCrt）进行比较。

基因分型实验

检测靶基因核酸序列

的单个单核苷酸多态

性 (SNP) 变体。

基因分型实验使用预先制定的 TaqMan™ SNP 基因分型测定，该测定包括以下组成部分：

•两个序列特异性的引物，用于扩增含目标 SNP 的序列

•等位基因 1 和等位基因 2 的两个等位基因特异性 TaqMan™ 探针

1. 软件以各反应孔中参比荧光染料的荧光值为基准，对报告基因染料的荧光值进行校准。

2. 软件在等位基因鉴别图上绘制各个样本反应孔中报告基因染料的校准后强度，这将对比

等位基因特异性探针的报告染料荧光强度。

3. 软件对样本数据进行分簇，根据其在图谱中的位置，指定各成簇样本的基因分型识别结

果。

阴性/阳性实验

确定样本中存在或不

存在靶基因核酸序

列。

软件根据算法确定的识别阈值来确定目标存在或不存在。（识别阈值与 Ct 阈值不同；Ct 阈值

非用于进行识别。）

第 1 章产品信息

实验类型

1

QuantStudio™ 1 Plus Real-Time PCR System

安装、使用及维护指南

19

目的描述

熔解曲线实验

确定使用嵌入染料的

PCR 扩增产物的熔解

温度 (Tm)。

在软件中，熔解曲线分析包含在使用嵌入染料的任何实验类型的默认运行条件中。

1. 软件根据染料的荧光相对于温度的变化绘制熔解曲线。

2. 软件使用熔解曲线计算熔解温度 (Tm)。

第 1 章产品信息

实验类型

1

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Thermo Fisher Scientific QuantStudio 1 Plus Real-Time PCR System ユーザーガイド

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