Thermo Fisher Scientific AmpliTaqGold Fast PCR master Mix?UP 取扱説明書

ブランド
Thermo Fisher Scientific
モデル
AmpliTaqGold Fast PCR master Mix?UP
タイプ
取扱説明書
AmpliTaq Gold
®
Fast PCR Master Mix, UP (2X)
AmpliTaq Gold
®
Fast PCR Master Mix, UP (2X)
クイックリファレンスカード
AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP は、ホットスタート機能を持ち、Fast PCR を行なうために最適化され
ています。このクイックレファレンスカードは、この製品の使用方法を簡単に示しています。さらに詳しい内容については、
AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP プロトコール ( 商品番号 4391138) をご参照下さい。
安全性やバイオハザードのガイドラインに関しては、AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP プロトコール
( 商品番号 4391138) に記載されている“Safety” の項をご参照下さい。
プロトコール
ステップ 操作
1PCR 反応溶液の調製 a. 使用する前に、ボトルを穏やかに回転させて試薬が均一になるように混和します。DNA テン
プレートやプライマーなどの他の試薬は、必要に応じて氷上で溶解します。
Note: AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP および PCR 反応溶液はセットアッ
プの間、氷上に置く必要はありません。
b. PCR の反応数に応じて、各々の試薬の容量を計算します。ピペッティング操作の間に発生
する溶液の損失を考慮し、必要量よりも少し多めに調製します。
Note: 各反応につき複数の反復をとることをお奨めします。
※ 1　最終濃度が一定であれば、反応容量は実験デザインに合わせて調製できます。
※ 2　総反応容量が 20µL であれば、水とテンプレートのあらゆる組合せが使用できます。
※ 3　推奨の 1 反応あたりのゲノム DNA 量は 10 コピー以上、0.2µg 以下です。
2PCR 反応プレートの
準備
a. プレートの各ウェルに調製した PCR 反応溶液を分注します。
・MicroAmp® Optical 96-Well Reaction Plate
(Veriti™ 96-Well サーマルサイクラー )
・MicroAmp® Fast 96-Well Reaction Plate
(Veriti™ 96-Well Fast サーマルサイクラー )
b. MicroAmp® Clear Adhesive Film でプレートをシールします。
重要 ! MicroAmp® Adhesive Seal Applicator を使用して、プレートとフィルムがしっか
りと密着し、確実にシールされていることを確認して下さい。
c. 軽く遠心して、PCR 反応溶液を各ウェルの底に集めます。
試薬 1 反応あたり※ 1 最終濃度
D.W. ※ 2
フォワードプライマー － 0.2 ～ 1.0 µM
リバースプライマー － 0.2 ～ 1.0 µM
DNA テンプレート ※ 2 ＜ 1ug / 反応※ 3
AmpliTaq Gold® Fast PCR
Master Mix, UP
10 µL 1 ×
Total 20 µL －
研究用にのみ使用できます。診断目的およびその手続き上での使用は出来ません。
Applied Biosystems, AB(design) and MicroAmp are registered trademarks and Applera and Veriti are trademarks of Applera Corporation or its subsidiaries
in the US and/or certain other countries.
AmpliTaqGold is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.
記載の社名および製品名は、弊社または各社の商標または登録商標です。
© 2008 Applied Biosystems Japan Ltd,. All rights reserved.
Printed in Japan, CPC023-A0806OB
ステップ 操作
3PCR の実行 下表を参考にサイクルプログラムを設定します。
このプログラムは Veriti サーマルサイクラーをベンチマークとして構築されており、Veriti モデルが最も適
しています。他のサーマルサイクラーにおいても最初にこの条件で反応を行ない、結果に応じて条件の最適
化を行なって下さい。
※ 1 アプライドバイオシステムズのサーマルサイクラーに搭載、またはウェブサイトにある Tm calculator
を用いて正確な Tm値をご確認下さい。Tm値算出には Salts Conc.=50mM, Primer Conc.= 使用す
るプライマー濃度を入力して下さい。
http://www.appliedbiosystems.com/support/techtools/calc/
※ 2 増幅サイズによってエクステンション時間を設定します。
4結果の解析 目的の方法でデータ解析を行ないます。PCR 増幅産物はゲル電気泳動、クローニング、サイク
ルシーケンシング反応などに使用できます。
増幅サイズ (kb) エクステンション時間 (sec)
0.5 5
1.0 15
1.5 30
Ordering Information
商品名 サイズ 商品番号
AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP 25 反応 4390937
250 反応 4390939
2500 反応 4390941
AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP プロトコール* 1 冊 4391138
AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP クイックリファレンスカード* 1 冊 4391137
* 製品にはプロトコールが含まれておりませんので、初めてご注文の際には、プロトコール、およびクイックリファレンスカードを併せてご注文下さい。
Step
Start of
Enzyme PCR PCR (Final Step)
HOLD
Cycle (35 Cycles)
HOLD HOLD
Denature Annealing Extension
温度 95 ˚C 96 ˚C Primer Tm※ 1 68 ˚C 72 ˚C 4 ˚C
時間 10 min 3 sec 3 sec 増幅サイズによる※ 2 10 sec ∞
  • Page 1 1
  • Page 2 2

Thermo Fisher Scientific AmpliTaqGold Fast PCR master Mix?UP 取扱説明書

ブランド
Thermo Fisher Scientific
モデル
AmpliTaqGold Fast PCR master Mix?UP
タイプ
取扱説明書
PDFをダウンロードします
報告

関連論文

その他のドキュメント