ver.20221202C
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色谱柱使用说明
Shodex Asahipak GS-220 20G, GS-320 20G
（为充分发挥色谱柱性能并保持长期稳定的使用，请在使用前仔细阅读使用说明。）
使用注意事项 ＜重要＞
警告 ※当取用用于分析的溶剂和试剂时，请确认制造商发出的安全数据表(SDS)，并遵守使用的注意事项，
否则可能会导致严重伤害或死亡。
※在取用有机溶剂、酸和碱等试剂时，应穿戴防护设备，如防护眼镜和手套，避免与人体直接接触，
存在化学伤害的风险。
使用前
(1) 检查色谱柱的包装和外观是否有异常。
(2) 检查色谱柱盒、柱身标签上的产品名称和序列号(Serial no.或S/N)。
(3) 出厂检测报告(CERTIFICATE OF ANALYSIS)请在Shodex官方网站点击出厂检测报告下载进行下载。下载
时需要输入产品序列号。
出厂检测报告下载链接 https://www.shodex.com/download/
1. 前言
感谢您购买Shodex的产品。
Shodex Asahipak GS-220 20G, GS-320 20G是聚合物基质尺寸排阻(SEC)制备色谱柱。根据不同流动相，可以
利用反相模式、亲水性相互作用模式 (HILIC)、离子交换模式相结合的复合模式进行分析，适用于分离分子量接
近的肽及核酸类样品。
2. 色谱柱各部分名称
请参照Shodex官方网站。
参照链接 https://www.shodex.com/cn/da/07.html
3. 色谱柱规格
订货号 产品名称
尺寸 (mm) 粒径
(μm)
理论塔板数
(1 根色谱柱)
线性分析范围*
（普鲁兰换算）
排阻限分子量*
（普鲁兰换算）
内径 长度
F6810034
Asahipak GS-220 20G
20.0 500 13 ≥ 14,000 300 ~ 3,000 7,000
F6810035
Asahipak GS-320 20G
20.0 500 13 ≥ 14,000 300 ~ 20,000 40,000
F6710021
Asahipak GS-20G 7B
7.5
50
20
（保护柱）
－
－
* 参考值
填料
：
聚乙烯醇多孔颗粒
色谱柱材质
：SUS-316
色谱柱末端螺母
：
外螺纹型
No.10-32 UNF
出厂
储存溶剂
：
水
/
甲醇
=70/30
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4. 使用条件
4-1. 基本条件
4-2. 可使用溶剂
溶剂 最大浓度
(%)
水
甲醇
乙醇
乙腈
Asahipak GS-220 20G
100
30
30
50
Asahipak GS-320 20G
100
100
100
50
(1) 可以使用磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、Tris 等缓冲溶液和氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸铵等各种
盐的水溶液。也可以两种混合使用。总盐浓度请控制在 0.5 M 以下，通常建议使用 0.05 ~ 0.3 M 的浓度。
(2) 也可以使用蛋白质变性剂如尿素和盐酸胍的水溶液。但是这些水溶液通常使用高浓度，溶剂置换时可能导致
色谱柱劣化，建议作为专用色谱柱使用。
(3) 也可以添加 SDS 和Brij-35 等表面活性剂。但是，表面活性剂容易在色谱柱中残留，使用后更换溶剂比更换
一般溶剂需要更多时间。使用 30 ~ 50 % (v/v)的甲醇水溶液置换，可以在较短时间内完成。
注意 ※请遵守使用条件，在可用范围之外使用可能会导致色谱柱性能下降。
※当使用缓冲液（或含盐的水溶液）和有机溶剂的混合溶液作为流动相时，请务必防止盐的析出。
※当使用高腐蚀性的盐类如氯化钠时，在分析结束后请冲洗设备和色谱柱，以确保没有盐的残留。
否则设备和柱子的金属部件可能会生锈。
※柱压随流动相组成、流速和柱温而变化。在改变流动相组成时，要调整流速和柱温，使其不超过最
大可用压力。
※高分子的分子量越大越容易引起分子链断裂。如果分子链断裂测试结果会比实际值小，造成再现性
差的问题。在可能引起分子链断裂的时候，请降低分析流速。
5. 流动相的配制
(1) 流动相请充分脱气防止有气泡。
(2) 流动相中含有不溶的杂质可能会导致色谱柱性能下降和色谱图噪声，因此请使用滤膜(0.45 μm)过滤流动相。
注意 ※使用水时，请使用超纯水装置新配制的水或者刚开封的 HPLC 级蒸馏水。使用有机溶剂时，请使用
HPLC 级以上的试剂。使用品质不同的有机溶剂时，使用前请确认其品质适合分析。开封时间长的
有机溶剂可能有性质改变、吸湿、污染的问题，请不要使用。
※请勿使用已长时间保存的流动相，组成的变化可能导致洗脱行为的变化和色谱柱的劣化。
参考 ※建议使用具有在线脱气功能的脱气机。
产品名称 流速
(mL/min)
耐压
(MPa/色谱柱) pH 范围 温度范围
(℃)
常用
最大
Asahipak GS-220 20G
4 ~ 6
8
详见附件
2 ~ 9
4 ~ 60
Asahipak GS-320 20G
5 ~ 8
12
2 ~ 12
Asahipak GS-20G 7B
－
－
－
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6. 样品的配制
(1) 尽量使用流动相溶解和稀释样品。如果难以溶解在流动相中，请尽量和流动相组成接近。
(2) 为了防止由于颗粒物（不溶物）的堵塞导致色谱柱变差，劣化或性能变差，请使用滤膜(0.45 μm)过滤样品。
(3) 样品进样量为 1 mL 以下。
(4) 高分子样品溶液的粘度和分子量及浓度有很大关系。样品溶液的粘度过高会造成峰变宽或延迟洗脱等问题，
影响分子量分布测定。一般来说分子量越大粘度越高，请降低样品浓度。请根据下列表格配制样品溶液。
样品分子量范围
浓度
(w/v)
~ 5,000
1.0 %
以下
5,000
~ 25,000
0.5 %
以下
25,000
~
200,000
0.25 %
以下
注意 ※样品使用非流动相溶剂溶解时，如果含有不溶于流动相的物质，可能会产生进样后堵塞色谱柱的情
况。
参考 ※为了保护分析柱，建议使用保护柱。
7. 色谱柱的使用方法
7-1. 流路中的溶剂置换
安装色谱柱前请先将设备中的流路充分洗净，完全置换成流动相。另外，请切换阀清洗并置换进样器的流路
（进样环）。 置 换不互溶或溶解性低的溶剂时，先使置换成双方溶剂都能互溶的溶剂，再置换成使用溶剂。
注意 ※色谱柱不能使用的溶剂在流路中残留可能会造成色谱柱的劣化。
※流动相组成发生显著变化，可能造成泵、管路中的污垢脱落，可能会造成色谱柱的劣化。
7-2. 色谱柱的连接
(1) 查看色谱柱身标签，然后将色谱柱连接到设备，使流动相沿流动方向（➡）流动。使用保护柱时，请依次先
连接保护柱，再连接分析柱。
(2) 请一边按住配管一边拧紧色谱柱的末端接头，防止配管和末端接头中产生空隙。空隙会造成样品的扩散，
导致色谱峰变宽。
(3) 将流速设置为 3.0 mL/min 以下然后开始送液。在升温使用色谱柱时，以低流送液直到达到设定温度，然后
逐渐将流速增加到所需流速。
(4) 色谱柱可以串联使用。排阻限分子量不同的色谱柱串联时，请先连接排阻限大的色谱柱。
警告 ※请检查溶剂是否泄露。否则可能会造成漏电、腐蚀或化学损坏。
注意 ※色谱柱连接到仪器上时，请避免气泡进入色谱柱，否则可能造成色谱柱劣化。
※当连接色谱柱或从停泵状态开始送液时，以 3.0 mL/min 以下流速送液，压力突然升高可能会使色
谱柱劣化。
※升温使用色谱柱后，将流速降低至 3.0 mL/min 以下并保持送液，柱温恢复至室温，然后停泵。否
则洗脱液冷却时发生收缩，在色谱柱内形成空隙可能导致色谱柱劣化。
参考 ※建议设置泵的报警压力，以避免超过最大可用压力。
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7-3. 流动相的置换
置换流动相时，请以 3.0 mL/min 以下的流速通液 3 ~ 5 倍的柱体积。
(1) 请事先确认柱中溶剂与要置换的溶剂是否互溶。
(2) 置换成和色谱柱储存溶剂不互溶或溶解性低的溶剂时，先置换成双方溶剂都能互溶的溶剂，再置换成使用溶
剂。
（例） 从高浓度的缓冲液（或者盐的水溶液）置换成水/乙腈混合溶液时，先置换成水，再置换成水/乙腈混
合溶液。
(3) 把GS-320 20G 的储存溶剂从水置换成醇类（甲醇或乙醇）时，先置换成水和醇类 1:1 的混合溶剂，再置换
成醇类。从醇类置换成水时也请同样操作。
（例） 从水置换成乙醇时，先置换成水和乙醇 1:1 的混合溶剂，再置换成乙醇。
注意 ※请不要频繁更换流动相组成，可能会造成色谱柱劣化。
7-4. 色谱柱清洗方法
流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内，可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化，这种情况
清洗色谱柱可能有改善效果。
使用保护柱时，请先去除保护柱进行检测，如果效果改善了，则可能是保护柱的原因，请清洗保护柱。
如果去除了保护柱仍然没有改善，请清洗保护柱和分析柱，请注意把保护柱和分析柱分开清洗。另外，几根色谱
柱串联使用时，请分开清洗。清洗色谱柱时，请不要连接检测器，流动相从色谱柱流出后直接流入废液缸即可。
如果清洗色谱柱后仍未改善，请更换新的色谱柱。
【清洗方法】
(1) 如果不溶物堵在色谱柱入口，可以逆接色谱柱并以小于正常流速一半的流速通流动相来将其除去。
(2) 吸附物质的具体清洗方法请参考下面例子。在清洗色谱柱时，请逆接色谱柱。请使用 3.0 mL/min 以下的流
速，通液量建议为 5 ~ 10 倍柱体积。
（清洗例 1） 疏水性物质的清洗 （使用水相流动相时）
添加乙腈、甲醇等极性有机溶剂通液。
（清洗例 2） 离子性物质的清洗
增加盐浓度通液。
注意 ※极性有机溶剂和盐浓度的添加范围，请参照第 4-2 节“可使用溶剂”。
※洗净液长时间保留在色谱柱中可能会造成色谱柱提前劣化，色谱柱清洗后请尽快更换成流动相。
8. 色谱柱的保存
置换成出厂时的储存溶剂，从装置中卸下色谱柱并拧紧两端堵头，在温度变化小的阴凉处储存。关于置换流动相，
请参照第 7-3 节 "流动相的置换"。
注意 ※色谱柱内绝对不能干燥，否则可能导致色谱柱劣化。
9. 色谱柱的检定方法
检定方法请参照产品的出厂检测报告(CERTIFICATE OF ANALYSIS)。Shodex采用「半峰宽法」测定理论塔板
数，采用非对称系数(FAS)作为峰对称性指标。详细的检定方法请参照Shodex官方网站。
参照链接 https://www.shodex.com/cn/da/07.html
注意 ※理论塔板数和 FAS 根据样品及分析条件的变化会有较大差异。在检定色谱柱出厂性能的时候，
请根据 CERTIFICATE OF ANALYSIS 记载的条件进行测试。
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10. 其它注意事项
(1) 请勿拧开色谱柱的末端螺丝。
(2) 请勿对色谱柱施加敲击，掉落等强烈冲击。
(3) 请按照各地废弃物标准正确废弃旧的产品。
产品相关的应用实例，请参考 Shodex 官方网站(https://www.shodex.com/)。如果还有其他问题，请联系购买的
经销商或者通过 Shodex 官方网站的[联系我们]进行咨询。
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