ver.20221202C
株式会社力森诺科 (https://www.shodex.com/)
3
7-2. 色谱柱的连接
(1) 查看色谱柱身标签,然后将色谱柱连接到设备,使流动相沿流动方向(➡)流动。使用保护柱时,请依次先
连接保护柱,再连接分析柱。
(2) 请一边按住配管一边拧紧色谱柱的末端接头,防止配管和末端接头中产生空隙。空隙会造成样品的扩散,
导致色谱峰变宽。
(3) 将流速设置为 1.0 mL/min 以下然后开始送液。在升温使用色谱柱时,以低流送液直到达到设定温度,然后
逐渐将流速增加到所需流速。
警告 ※请检查溶剂是否泄露。否则可能会造成漏电、腐蚀或化学损坏。
注意 ※色谱柱连接到仪器上时,请避免气泡进入色谱柱,否则可能造成色谱柱劣化。
※当连接色谱柱或从停泵状态开始送液时,以 1.0 mL/min 以下的流速送液,压力突然升高可能会使
色谱柱劣化。
※色谱柱升温使用后,请使用 1.0 mL/min 以下的流速继续送液至色谱柱回复室温后再停泵。如果在
色谱柱温度很高时停止送液,当流动相温度降低时发生收缩会造成色谱柱内部空隙,使色谱柱劣化。
参考 ※建议设置泵的报警压力,以避免超过最大可用压力。
7-3. 流动相的置换
置换流动相时,请以 1.0 mL/min 以下的流速通液 3 ~ 5 倍的柱体积。
(1) 请事先确认柱中溶剂与要置换的溶剂是否互溶。
(2) 置换不互溶或溶解性低的溶剂时,先置换成双方溶剂都能互溶的溶剂,再置换成使用溶剂。
(例) 当用水/乙腈混合溶液置换高浓度的缓冲溶液(或盐的水溶液)时,请先置换成水,再置换成水/乙腈
混合溶液。
(3) 在进行梯度洗脱时,由于流动相成分的变化,在梯度洗脱过程中柱压可能超过最大可用压力。调整流速和柱
温,使其不超过最大可用压力。
7-4. 色谱柱清洗方法
流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内,可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化,这种情况
清洗色谱柱可能有改善效果。
使用保护柱时,请先去除保护柱进行检测,如果效果改善了,则可能是保护柱的原因,请清洗保护柱。
如果去除了保护柱仍然没有改善,请清洗保护柱和分析柱,请注意把保护柱和分析柱分开清洗。另外,几根色谱
柱串联使用时,请分开清洗。清洗色谱柱时,请不要连接检测器,流动相从色谱柱流出后直接流入废液缸即可。
如果清洗色谱柱后仍未改善,请更换新的色谱柱。
【清洗方法】
(1) 如果不溶物堵在色谱柱入口,可以逆接色谱柱并以小于正常流速一半的流速通流动相来将其除去。
(2) 吸附物质的具体清洗方法请参考下面例子。在清洗色谱柱时,请逆接色谱柱。请使用 1.0 mL/min 以下的流
速,通液量建议为 5 ~ 10 倍柱体积。
(清洗例 1:碱清洗) 长期使用酸性至中性的流动相条件时
使用 0.1 M 氢氧化钠水溶液/乙腈= 80/20 的溶液通液。
(清洗例 2:酸清洗) 长期使用碱性至中性的流动相条件时
使用 50 mM 磷酸水溶液/乙腈= 90/10 的溶液通液。