ver.20221202C
株式会社力森诺科 (https://www.shodex.com/)
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7-2. 色谱柱的连接
(1) 查看色谱柱身标签,然后将色谱柱连接到设备,使流动相沿流动方向(➡)流动。使用保护柱时,请依次先
连接保护柱,再连接分析柱。
(2) 请一边按住配管一边拧紧色谱柱的末端接头,防止配管和末端接头中产生空隙。空隙会造成样品的扩散,
导致色谱峰变宽。
(3) 将流速设置为 2.5 mL/min 以下然后开始送液。在升温使用色谱柱时,以低流送液直到达到设定温度,然后
逐渐将流速增加到所需流速。
警告 ※请检查溶剂是否泄露。否则可能会造成漏电、腐蚀或化学损坏。
注意 ※色谱柱连接到仪器上时,请避免气泡进入色谱柱,否则可能造成色谱柱劣化。
※当连接色谱柱或从停泵状态开始送液时,以 2.5 mL/min 以下的流速送液,压力突然升高可能会使
色谱柱劣化。
※色谱柱升温使用后,请使用 2.5 mL/min 以下的流速继续送液至色谱柱回复室温后再停泵。如果在
色谱柱温度很高时停止送液,当流动相温度降低时发生收缩会造成色谱柱内部空隙,使色谱柱劣化。
参考 ※建议设置泵的报警压力,以避免超过最大可用压力。
7-3. 流动相的置换
置换流动相时,请以 2.5 mL/min 以下的流速通液 3 ~ 5 倍的柱体积。
(1) 请事先确认柱中溶剂与要置换的溶剂是否互溶。
(2) 置换不互溶或溶解性低的溶剂时,先置换成双方溶剂都能互溶的溶剂,再置换成使用溶剂。
(例) 当用高浓度的缓冲溶液置换水/乙腈混合溶液时,请先置换成水,再置换成缓冲溶液。
(3) 在进行梯度洗脱时,由于流动相成分的变化,在梯度洗脱过程中柱压可能超过最大可用压力。调整流速和柱
温,使其不超过最大可用压力。
注意 ※当用缓冲溶液和有机溶剂的混合溶液置换水/乙腈时,先用不含有有机溶剂的缓冲溶液通液 10 ~ 20
倍柱体积进行预平衡后再置换成使用溶剂。只用水和乙醇的混合溶液或纯缓冲溶液置换时,不需要
进行预平衡。
※当用水和有机溶剂的混合溶液置换纯缓冲溶液或缓冲溶液和有机溶剂的混合溶液时,先进行碱清洗
再置换。(「 请参照 7-4. “色谱柱的清洗” 清洗例 1」。)
7-4. 色谱柱清洗方法
流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内,可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化,这种情况
清洗色谱柱可能有改善效果。
使用保护柱时,请先去除保护柱进行检测,如果效果改善了,则可能是保护柱的原因,请清洗保护柱。
如果去除了保护柱仍然没有改善,请清洗保护柱和分析柱,请注意把保护柱和分析柱分开清洗。另外,几根色谱
柱串联使用时,请分开清洗。清洗色谱柱时,请不要连接检测器,流动相从色谱柱流出后直接流入废液缸即可。
如果清洗色谱柱后仍未改善,请更换新的色谱柱。