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色谱柱使用说明
Shodex SUGAR KS-800 系列
（为充分发挥色谱柱性能并保持长期稳定的使用，请在使用前仔细阅读使用说明。）
使用注意事项 ＜重要＞
警告 ※当取用用于分析的溶剂和试剂时，请确认制造商发出的安全数据表(SDS)，并遵守使用的注意事项，
否则可能会导致严重伤害或死亡。
※在取用有机溶剂、酸和碱等试剂时，应穿戴防护设备，如防护眼镜和手套，避免与人体直接接触，
存在化学伤害的风险。
使用前
(1) 检查色谱柱的包装和外观是否有异常。
(2) 检查色谱柱盒、柱身标签上的产品名称和序列号(Serial no.或S/N)。
(3) 出厂检测报告(CERTIFICATE OF ANALYSIS)请在Shodex官方网站点击出厂检测报告下载进行下载。下载
时需要输入产品序列号。
出厂检测报告下载链接 https://www.shodex.com/download/
1. 前言
感谢您购买Shodex的产品。
Shodex SUGAR KS-800 系列是适用于糖分析的高性能色谱柱，填料采用硬质苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为基质
的强酸性阳离子交换树脂。分子量小的糖类利用配位体交换和尺寸排阻相结合的复合模式，可以实现单糖类和二
糖类的分离。此外，分子量大的低聚糖和多糖类样品，主要利用尺寸排阻模式，适合进行分子量分布的测定。我
们有一系列排阻限不同的产品，可以根据样品的分子量范围进行选择。
2. 色谱柱各部分名称
请参照Shodex官方网站。
参照链接 https://www.shodex.com/cn/da/07.html
3. 色谱柱规格
订货号 产品名称 尺寸
(mm)
粒径
(μm)
理论塔板数
(1 根色谱柱)
排阻限分子量*1
（普鲁兰换算）
内径
长度
F6378010
SUGAR KS-801
8.0
300
6
≥ 17,000
1,000
F6378020
SUGAR KS-802
8.0
300
6
≥
17,000
10,000
F6378025
SUGAR KS-803
8.0
300
6
≥
17,000
50,000
F6378035
SUGAR KS-804
8.0
300
7
≥
17,000
400,000
F6700020
SUGAR KS-G 6B
6.0
50
10
（保护柱）
－
* 参考值
填料
：
键合了磺基（抗衡离子
: Na+
）的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物多孔颗粒
色谱柱材质
：SUS-316
色谱柱末端螺母
：
外螺纹型
No.10-32 UNF
出厂
储存溶剂
：
水
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4. 使用条件
* 为了避免糖的端基异构体的分离造成峰型不良，建议使用高温分析。
可用溶剂如下。
(1) 基本的流动相为水。
(2) 也可以在流动相中添加盐。请使用氯化钠或硝酸钠，并且必须调整 pH 值为 3 ~ 7。分析含有大量重金属的样
品时，请在流动相中添加 10 ~ 50 µg/mL 的EDTA-4Na，可以防止色谱柱性能劣化。
(3) 也可以添加乙腈或乙醇。KS-801 ~ KS-803 的添加量为 20 % (v/v)以下，KS-804 的添加量为 50 % (v/v)以
下。
注意 ※请遵守使用条件，在可用范围之外使用可能会导致色谱柱性能下降。
※请不要使用钠盐以外的盐。使用其他的盐会导致磺基上的钠离子被其他离子置换，造成色谱柱劣化。
※当使用盐的水溶液和有机溶剂的混合溶液作为流动相时，请务必防止盐的析出。
※柱压随流动相组成、流速和柱温而变化。在改变流动相组成时，要调整流速和柱温，使其不超过最
大可用压力。
※高分子的分子量越大越容易引起分子链断裂。如果分子链断裂测试结果会比实际值小，造成再现性
差的问题。在可能引起分子链断裂的时候，请降低分析流速。
5. 流动相的配制
(1) 流动相请充分脱气防止有气泡。
(2) 流动相中含有不溶的杂质可能会导致色谱柱性能下降和色谱图噪声，因此请使用滤膜(0.45 μm)过滤流动相。
注意 ※使用水时，请使用超纯水装置新配制的水或者刚开封的 HPLC 级蒸馏水。使用有机溶剂时，请使用
HPLC 级以上的试剂。使用品质不同的有机溶剂时，使用前请确认其品质适合分析。开封时间长的
有机溶剂可能有性质改变、吸湿、污染的问题，请不要使用。
※请勿使用已长时间保存的流动相，组成的变化可能导致洗脱行为的变化和色谱柱的劣化。
参考 ※建议使用具有在线脱气功能的脱气机。
6. 样品的配制
(1) 尽量使用流动相溶解和稀释样品。如果难以溶解在流动相中，请尽量和流动相组成接近。对于梯度洗脱，
建议使用初始流动相配制样品。
(2) 为了防止由于颗粒物（不溶物）的堵塞导致色谱柱变差，劣化或性能变差，请使用滤膜(0.45 μm)过滤样品。
(3) 单糖类、寡糖类的样品进样量为 20 μL以下，多糖类的样品进样量为 50 ~ 100 μL。
(4) 高分子样品溶液的粘度和分子量及浓度有很大关系。样品溶液的粘度过高会造成峰变宽或延迟洗脱等问题，
影响分子量分布测定。一般来说分子量越大粘度越高，请降低样品浓度。请根据下列表格配制样品溶液。
产品名称 流速
(mL/min)
耐压
(MPa/色谱柱)
温度
(
℃
)
常用
最大
建议*
最大
SUGAR KS-801
0.5 ~ 1.0 1.5 5.0 50 ~ 85 85
SUGAR KS-802
SUGAR KS-803
SUGAR KS-804
SUGAR KS-G 6B
－
－
－
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样品分子量范围
浓度
(w/v)
~ 5,000
1.0 %
以下
5,000
~ 25,000
0.5 %
以下
25,000
~
200,000
0.25 %
以下
200,000
~ 2,000,000
0.1 %
以下
2,000,000
~
0.05 %
以下
(5) 样品溶液如果是酸性或者碱性，请先中和。
(6) 样品中如果含有钠离子以外的阳离子（中和后含有），请使用阳离子交换树脂去除。
(7) 含有蛋白质或油脂的样品，请务必进行除蛋白和脱脂的操作。除蛋白的方法有加酸、加乙腈以及超滤等。添
加酸的时候请务必中和以后再进样。此外，添加乙腈时，请务必确认乙腈的最终浓度低于 20 % (v/v)以后再
进样。
(8) 样品中如果含有很多有机酸，请使用 OH 型阴离子交换树脂去除。
(9) 样品中如果含有疏水性物质或者表面活性剂，请使用反相固相萃取柱去除。
注意 ※样品使用非流动相溶剂溶解时，如果含有不溶于流动相的物质，可能会产生进样后堵塞色谱柱的情
况。
参考 ※为了保护分析柱，建议使用保护柱。
7. 色谱柱的使用方法
7-1. 流路中的溶剂置换
安装色谱柱前请先将设备中的流路充分洗净，完全置换成流动相。另外，请切换阀清洗并置换进样器的流路
（进样环）。 置 换不互溶或溶解性低的溶剂时，先使置换成双方溶剂都能互溶的溶剂，再置换成使用溶剂。
注意 ※色谱柱不能使用的溶剂在流路中残留可能会造成色谱柱的劣化。
※流动相组成发生显著变化，可能造成泵、管路中的污垢脱落，可能会造成色谱柱的劣化。
7-2. 色谱柱的连接
(1) 查看色谱柱身标签，然后将色谱柱连接到设备，使流动相沿流动方向（➡）流动。使用保护柱时，请依次先
连接保护柱，再连接分析柱。
(2) 请一边按住配管一边拧紧色谱柱的末端接头，防止配管和末端接头中产生空隙。空隙会造成样品的扩散，
导致色谱峰变宽。
(3) 将流速设置为 0.2 ~ 0.3 mL/min 然后开始送液。在升温使用色谱柱时，以低流送液直到达到设定温度，然后
逐渐将流速增加到所需流速。
(4) 分析完毕停泵时，请把流速下调至 0.2 ~ 0.3 mL/min，等色谱柱温度降低到室温后再停泵。
(5) 色谱柱可以串联使用。当使用不同排阻限的色谱柱串联时，先连接排阻限大的色谱柱。
警告 ※请检查溶剂是否泄露。否则可能会造成漏电、腐蚀或化学损坏。
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注意 ※色谱柱连接到仪器上时，请避免气泡进入色谱柱，否则可能造成色谱柱劣化。
※当连接色谱柱或从停泵状态开始送液时，以 0.2 ~ 0.3 mL/min 流速送液，压力突然升高可能会使色
谱柱劣化。
※如果在色谱柱温度很高时停止送液，当流动相温度降低时发生收缩会造成色谱柱内部空隙，使色谱
柱劣化。
参考 ※建议设置泵的报警压力，以避免超过最大可用压力。
7-3. 流动相的置换
置换流动相时，请加热色谱柱至 50 ℃，并以 0.2 ~ 0.3 mL/min 的流速通液 3 ~ 5 倍的柱体积。
注意 ※请不要频繁变化流动相组成，可能会造成色谱柱性能下降。
7-4. 色谱柱清洗方法（再生）
流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内，可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化，这种情况
清洗（再生）色谱柱可能有改善效果。
使用保护柱时，请先去除保护柱进行检测，如果效果改善了，则可能是保护柱的原因，请清洗（再生）保护柱。
如果去除了保护柱仍然没有改善，请清洗（再生）保护柱和分析柱，请注意把保护柱和分析柱分开清洗（再生）。
另外，几根色谱柱串联使用时，请分开清洗（再生）。清洗（再生）色谱柱时，请不要连接检测器，流动相从色
谱柱流出后直接流入废液缸即可。
如果清洗（再生）色谱柱后仍未改善，请更换新的色谱柱。
【清洗方法】
如果不溶物堵在色谱柱入口，可以逆接色谱柱并以小于正常流速一半的流速通流动相来将其除去。
【再生方法】
色谱柱中混入钠离子以外的离子性物质（阳离子）时，会置换掉抗衡离子钠离子，使分离模式改变或峰型不良。
发生这种情况时，可以使用下述操作把钠离子置换回来，色谱柱可能再生。
（再生例 1）
设置色谱柱温度 50 ℃，用 0.2 M 氢氧化钠水溶液以 0.5 mL/min 的流速通液 50 mL，洗净后，用水充分置换。
（再生例 2）
设置色谱柱温度 50 ℃，一边使用水作为流动相以 0.5 mL/min 的流速通液，一边使用 1 M 氢氧化钠水溶液进样
40 µL，也有可能再生色谱柱。
注意 ※再生液长时间保留在色谱柱中可能会造成色谱柱提前劣化，色谱柱清洗后请尽快更换成流动相。
※氢氧化钠等强碱性溶液可能会损坏检测器，所以请不要连接检测器，洗净液从色谱柱中流出后直接
进入废液缸。
8. 色谱柱的保存
置换成出厂时的储存溶剂，从装置中卸下色谱柱并拧紧两端堵头，在温度变化小的阴凉处储存。关于置换流动相，
请参照第 7-3 节 "流动相的置换"。
注意 ※色谱柱内绝对不能干燥，否则可能导致色谱柱劣化。
9. 色谱柱的检定方法
检定方法请参照产品的出厂检测报告(CERTIFICATE OF ANALYSIS)。Shodex采用「半峰宽法」测定理论塔板
数，采用非对称系数(FAS)作为峰对称性指标。详细的检定方法请参照Shodex官方网站。
参照链接 https://www.shodex.com/cn/da/07.html
注意 ※理论塔板数和 FAS 根据样品及分析条件的变化会有较大差异。在检定色谱柱出厂性能的时候，
请根据 CERTIFICATE OF ANALYSIS 记载的条件进行测试。
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10. 其它注意事项
(1) 请勿拧开色谱柱的末端螺丝。
(2) 请勿对色谱柱施加敲击，掉落等强烈冲击。
(3) 请按照各地废弃物标准正确废弃旧的产品。
产品相关的应用实例，请参考 Shodex 官方网站(https://www.shodex.com/)。如果还有其他问题，请联系购买的
经销商或者通过 Shodex 官方网站的[联系我们]进行咨询。
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