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カラム取扱説明書
Shodex OHpak SB-800 HQ シリーズ
（カラム性能を十分に発揮させ、安定して長期間ご利用いただくために、取扱説明書をよく読んでからお使いください。）
取り扱い上の注意 ＜重要＞
警告 ※分析に使用する溶媒や試薬を取り扱う際は、製造元が発行する安全データシート(SDS)を確認し、
使用上の注意事項を順守してください。死亡または重傷を負う可能性があります。
※有機溶媒や酸、アルカリなどの試薬を取り扱う際は、直接人体に触れないよう保護メガネや手袋などの
保護具を着用してください。薬傷のおそれがあります。
ご使用の前に
(1) 梱包状態、カラムの外観に異常がないか確認してください。
(2) カラム外箱とカラム本体に貼られているラベルシールに製品名、シリアルナンバー(Serial no.またはS/N)が記載
されていますので確認してください。
(3) 検査成績書(CERTIFICATE OF ANALYSIS)は、Shodex WEBサイトの検査成績書ダウンロードページに
アクセスし、ダウンロードしてください。ダウンロードにはシリアルナンバーの入力が必要です。
検査成績書ダウンロードURL https://www.shodex.com/download/
1. はじめに
このたびは、Shodex製品をご購入いただき、ありがとうございます。
Shodex OHpak SB-800 HQ シリーズは、水系のサイズ排除クロマトグラフィー用充てんカラムです。各種水溶性
高分子、タンパク質、オリゴマーなどの分離、また高分子の分子量分布測定に適しています。排除限界分子量が
異なる製品をラインアップしていますので、測定試料の分子量範囲に適したカラムを選択ください。
2. カラム各部の名称
Shodex WEBサイトを参照ください。
参照URL https://www.shodex.com/ja/da/07.html
3. カラムの仕様
製品コード 製品名
サイズ (mm) 粒径
(μm)
理論段数
（カラム 1本当たり）
対象分子量範囲*1
（プルラン換算）
排除限界分子量*1
（プルラン換算）
内径 長さ
F6429100
OHpak SB-802 HQ
8.0 300 8 12,000 以上 200 ~ 1,000 1,000
F6429101
OHpak SB-802.5 HQ
8.0 300 6
16,000
以上
500 ~ 10,000 10,000
F6429102
OHpak SB-803 HQ
8.0 300 6 16,000 以上 1,000 ~ 100,000 100,000
F6429103
OHpak SB-804 HQ
8.0 300 10 16,000 以上 5,000 ~ 400,000 1,000,000
F6429104
OHpak SB-805 HQ
8.0
300
13
12,000
以上
100,000 ~ 1,000,000 (4,000,000)*2
F6429105
OHpak SB-806 HQ
8.0 300 13 12,000 以上 100,000 ~ (20,000,000)*2 (20,000,000)*2
F6429106
OHpak SB-806M HQ
8.0 300 13
12,000
以上
500 ~ (20,000,000)*2
(20,000,000)*2
F6709430
OHpak SB-G 6B
6.0
50
10
（ガードカラム）
－ －
F6429108
OHpak SB-807 HQ
8.0 300 35
1,500
以上
500,000 ~ (500,000,000) *2 (500,000,000)*2
F6709431
OHpak SB-807G
8.0 50 35 （ガードカラム） － －
SB-806M HQ は、分子量分布の広い試料に対応したミックスゲルカラムです。
*1 参考値としてご利用ください。
*2 ( )内は推定値
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充てん剤
：
ポリヒドロキシメタクリレート系多孔質粒子
カラム材質
： SUS-316
カラム末端接続ネジ
：
オシネジ型
No. 10-32 UNF
出荷時封入液
：
0.02 %
アジ化ナトリウム水溶液 （
SB-802 HQ ~ SB-806M HQ
および
SB-G 6B
）
水 （
SB-807 HQ
および
SB-807G
）
4. 使用可能条件
4-1. 基本条件
4-2. 使用可能溶媒
製品名
最大濃度
(%)
メタノール アセトニトリル N,N-ジメチルホルムアミド
(DMF)
ジメチルスルホキシド
(DMSO)*
OHpak SB-802 HQ
0
0
0
0
OHpak SB-802 5 HQ ~
SB-803 HQ
100 75 100 100
OHpak SB-804 HQ ~
SB-806M HQ,
OHpak SB-G 6B
75 75 100 100
OHpak SB-807 HQ,
OHpak SB-807G
30 30 0 0
* 50 ~ 70 ℃の範囲で使用してください。
(1) リン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、トリスなどの各種緩衝液や塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、
硫酸カリウム、硫酸アンモニウムなどの各種塩の水溶液が使用可能です。また、両者の併用も可能です。全塩濃度
は、0.5 M 以下にしてください。通常は、0.05 ~ 0.3 M が適当です。
(2) DMF やDMSO に臭化リチウムなどの塩を添加して使用することも可能です。添加の目安は、10 ~ 50 mM です。
(3) タンパク質の変性剤である尿素や塩酸グアニジンの水溶液も使用可能です。ただし、これらの水溶液は通常、
高濃度水溶液で使用するため、溶媒置換時にカラムを劣化させるおそれがあります。専用カラムとして使用する
ことをお勧めします。
(4) SDS やBrij-35 などの界面活性剤を添加することも可能です。ただし、界面活性剤はカラムに残留しやすいため、
使用後の溶媒置換は、一般的な溶媒との置換に比べて時間を要します。30 ~ 50 % (v/v)程度のメタノール
水溶液で置換すると比較的短時間で行えます。（SB-802 HQ は有機溶媒を通液できません。）
注意 ※使用条件を順守してください。使用可能範囲外での使用は、カラムを劣化させるおそれがあります。
※緩衝液（または塩の水溶液）と有機溶媒の混合溶媒を使用する場合は、塩が析出しないことを確認して
ください。
※塩化物イオンを添加する場合は、pH は6以上で使用してください。
製品名
流量
(mL/min)
最大圧力
（MPa/カラム） pH 範囲 温度範囲
(℃)
常用
最大
OHpak SB-802 HQ ~ SB-803 HQ
0.5 ~ 1.0 1.2
5.0
3 ~ 10
4 ~ 70
OHpak SB-804 HQ ~ SB-806M HQ
3.0
OHpak SB-G 6B
－ － －
OHpak SB-807 HQ
0.5 ~ 1.0
1.5
0.5
4 ~ 60
OHpak SB-807G
－ － －
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※塩化ナトリウムなど腐食性の高い塩を使用する場合は、分析終了後、装置やカラムに塩が残らないように
洗い流してください。装置やカラムの金属部分が錆びるおそれがあります。
※ホウ酸緩衝液は、充てん剤のジオール基とコンプレックスを形成するので使用しないでください。
※カラム圧力は、溶離液組成、流量、カラム温度によって変動します。溶離液の組成を変更する場合は、
使用可能最大圧力を超えないように流量やカラム温度を調整してください。
※高分子は、分子量が大きくなるほど分子鎖切断が起きやすくなります。分子鎖が切断されると真の
分子量よりも小さい値を示したり、再現性が悪くなることがあります。分子鎖切断が起きている可能性が
ある場合は、流量を下げて分析することをお勧めします。
5. 溶離液の調製
(1) 気泡の発生を防ぐため、溶離液は十分に脱気してください。
(2) 微細なゴミや不溶物が混在すると、カラムの性能低下やクロマトグラムのノイズの原因となりますので、メンブラン
フィルター(0.45 μm)で溶離液をろ過してください。
注意 ※水は、超純水製造装置で用時調製した水や開封直後の HPLC グレードの蒸留水を使用してください。
有機溶媒は、HPLC で問題無く使用できる品質が保証された HPLC グレードの使用をお勧めします。
異なるグレードの有機溶媒を用いる場合は、分析に適した品質であることを確認してから使用して
ください。なお、開封後、長時間経過したものは使用しないでください。変性や吸湿、汚染などが起きて
いる可能性があります。
※長期間保存した溶離液は、使用しないでください。組成の変化などにより、溶出挙動の変化やカラムの
劣化につながるおそれがあります。
参考 ※オンラインで脱気が可能なデガッサの使用をお勧めします。
6. 試料の調製
(1) 試料の溶解および希釈には、できるだけ溶離液を用いてください。溶離液に溶解しにくい場合は、可能な限り
溶離液組成に近づけるようにしてください。
(2) 粒子状物質（不溶性物質）の目詰まりによるカラムの劣化もしくは性能の低下を防ぐため、試料はあらかじめ
メンブランフィルター(0.45 μm)などでろ過してください。
(3) 分子量が 1,000,000 以上の高分子試料は、溶離液中で半日から 1日静置し、試料を十分に膨潤させた後、試料
溶液を静かにかくはんして試料を完全に溶解させます。かくはんによる分子鎖切断に注意してください。
(4) 試料注入量は 50 ~ 100 μL が目安です。
(5) 高分子試料溶液の粘度は、高分子の分子量や濃度が大きく関係します。試料溶液の粘度が高いとピーク幅の
広がりや溶出の遅れが生じ、分子量分布測定に影響を与えます。一般的に分子量が大きくなるほど粘度は
高くなるため、試料濃度を下げてください。下記の表を目安に試料溶液を調製してください。
試料の分子量範囲
濃度
(w/v)
~ 5,000
1.0 %
以下
5,000
~ 25,000
0.5 %
以下
25,000
~
200,000
0.25 %以下
200,000
~ 2,000,000
0.1 %
以下
2,000,000
~
0.05 %
以下
注意 ※試料を溶離液と異なる溶媒で溶解させた場合、溶離液に不溶な成分が存在すると注入後に析出
してカラムを詰まらせるおそれがあります。
参考 ※分析カラム保護のため、ガードカラムの使用をお勧めします。
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7. カラムの使用方法
7-1. 流路の溶媒置換
カラムを装置に接続する前に装置の流路を十分に洗浄し、使用する溶離液で完全に置換してください。また、
インジェクター流路（サンプルループ）もバルブを切り替えて洗浄し、置換してください。混和性または溶解性が低い
溶媒に置換する場合は、双方の溶媒と混和性または溶解性のある溶媒組成に置換してから使用する溶媒に置換して
ください。
注意 ※カラムに使用できない溶媒が流路に残っているとカラムを劣化させるおそれがあります。
※溶離液の組成が大きく変わると、ポンプや配管に吸着していた汚れが剥がれ、カラムを劣化させる
おそれがあります。
7-2. カラムの接続
(1) カラム本体に貼られているラベルシールを確認し、Flow 方向（➡）へ溶離液が流れるようにカラムを装置に接続
してください。ガードカラムを使用する場合は、ガードカラム、分析カラムの順に接続します。
(2) 配管とカラムのエンドフィッティングの間に空隙ができないように、配管をエンドフィッティングの奥に押し当てながら
オシネジで固定してください。空隙があると試料が拡散し、ピークの広がりの原因となります。
(3) 流量を 0.3 mL/min 以下に設定し、通液を開始してください。カラムを加温して使用する場合は、設定温度に
なるまでは低流量のまま通液し、設定温度に達してから段階的に設定流量まで上げてください。
(4) カラムを複数本連結して使用することが可能です。排除限界分子量が異なるカラムを連結する場合は、上流側に
排除限界分子量が大きいカラムを配置してください。なお、SB-806M HQ は、較正曲線の直線性を考慮して
排除限界分子量の異なる充てん剤を混合しているため、他のシリーズカラムを連結すると混合比率が崩れ、
較正曲線が歪む可能性があります。SB-806M HQ を連結して使用する場合は、SB-806M HQ 同士を連結して
ください。
警告 ※溶媒の液漏れがないか確認してください。漏電や腐食、薬傷の原因となります。
注意 ※カラムを装置に接続する時は、カラム内に気泡が入らないようにしてください。カラムを劣化させるおそれ
があります。
※カラム接続時、または通液を停止している状態から通液を開始する時は、0.3 mL/min 以下の流量で
通液してください。急激な圧力上昇はカラムを劣化させるおそれがあります。
※カラムを加温して使用した後は、流量を 0.3 mL/min 以下に下げて通液を続け、カラム温度を室温に
戻してからポンプの通液を止めてください。カラム温度が高いまま通液を止めると溶離液の温度が下がる
時に溶離液が収縮することでカラム内に空隙が発生し、カラムを劣化させるおそれがあります。
参考 ※使用可能最大圧力を超える使用を避けるため、ポンプのリミッタを設定することをお勧めします。
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7-3. 溶離液の置換
溶離液を置換する時は、0.3 mL/min 以下の流量でカラム体積の 3 ~ 5 倍量を通液してください。
(1) カラムに封入されている溶媒と置換する溶媒が混和するかどうかを確認してください。
(2) カラムに封入されている溶媒と混和性のある溶媒で置換する場合は、カラムに封入されている溶媒と置換する溶媒
の1:1 の混合溶媒を通液してから、使用する溶媒に置換してください。
（例） 緩衝液（または塩の水溶液）からメタノールに置換する場合は、緩衝液（または塩の水溶液）とメタノールの
1:1 の混合溶媒を通液してからメタノールに置換してください。
(3) カラムに封入されている溶媒と混和性または溶解性が低い溶媒に置換する場合は、双方の溶媒と混和性または
溶解性のある溶媒組成に置換してから、使用する溶媒に置換してください。
（例） 高塩濃度の緩衝液（または塩の水溶液）から水/アセトニトリルに置換する時は、水を通液してから
水/アセトニトリルに置換してください。
注意 ※溶離液組成の頻繁な変更はしないでください。カラムを劣化させるおそれがあります。
7-4. カラムの洗浄
流路系や試料中の不溶性物質または吸着性物質がカラム内に蓄積することで、溶出挙動や圧力の変化が生じる
ことがあります。このような場合は、カラムを洗浄することで改善できる可能性があります。
ガードカラムを使用している場合は、最初にガードカラムを外して再測定してください。これで改善する場合は、
ガードカラムに原因がある可能性が高いため、ガードカラムを洗浄してください。
ガードカラムを外しても改善が見られない場合は、ガードカラムと分析カラムの両方を洗浄してください。なお、ガード
カラムと分析カラムは連結せずに個別に洗浄してください。また、分析カラムを複数本連結して使用している場合は、
それぞれ 1本ずつ洗浄してください。カラム洗浄時は、検出器は接続せず、洗浄液はカラム出口から直接廃液容器で
受け取るようにしてください。
カラムを洗浄しても改善しない場合は、新品カラムと交換してください。
【洗浄方法】
(1) 不溶性物質がカラムの入口に目詰まりした場合は、カラムを逆向きにつなぎ替え、溶離液を常用流量の半分以下
の流量で通液することにより取り除けることがあります。
(2) 吸着性物質の具体的な洗浄方法は下記の例を参考にしてください。カラム洗浄時は、カラムを逆向きにつなぎ
替えてください。流量は 0.5 mL/min 以下で行ってください。通液量はカラム体積の 5 ~ 10 倍量が目安です。
（洗浄例 1） 疎水性物質の洗浄 （水系溶離液の場合）
アセトニトリルやメタノールなどの極性有機溶媒を添加して通液します。
（洗浄例 2） イオン性物質の洗浄
塩濃度を上げて通液します。
注意 ※極性有機溶媒や塩濃度は、「4-2. 使用可能溶媒」の範囲内で添加してください。
※洗浄液のまま長時間封入するとカラムの劣化を早めるおそれがあります。カラム洗浄後は速やかに
溶離液に置換してください。
8. カラムの保管
出荷時封入液に置換した後、装置から外して両端を付属の栓で密栓し、温度変化の少ないところ（冷暗所）で保存
してください。溶離液の置換については、「7-3. 溶離液の置換」の項を参照してください。
注意 ※カラム内は絶対に乾燥させないでください。カラムを劣化させるおそれがあります。
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9. カラムの検定方法
検定条件は、本製品のCERTIFICATE OF ANALYSISに記載されていますので確認してください。Shodexでは、
理論段数の算出は、「半値幅法」を採用しております。また、ピーク対称性の指標には、非対称係数(FAS)を採用して
おります。詳細につきましてはShodex WEBサイトを参照ください。
参照URL https://www.shodex.com/ja/da/07.html
注意 ※理論段数や FAS は試料条件や分析条件が異なると値が大きく変わります。出荷時のカラム性能と比較
する場合は、CERTIFICATE OF ANALYSIS に記載の試料条件および分析条件に揃えて測定して
ください。
10. その他の注意事項
(1) カラムのエンドフィッティングは、絶対に外さないでください。
(2) カラムには、叩く、落とすなどの強い衝撃を与えないでください。
(3) 各地方自治体が定める廃棄物の適正処理に従って廃棄処理を行ってください。
製品に関する情報や分析例は、Shodex WEB サイト(https://www.shodex.com/)を参照してください。その他、
ご不明な点は、購入した販売店または Shodex WEB サイトからお問い合わせください。
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Shodex SB-802.5 HQ (OHpak) 取扱説明書
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