ver.20221202J
株式会社レゾナック (https://www.shodex.com/)
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使用可能な溶媒は、以下の通りです。
(1) 基本の溶離液は、水です。
(2) 塩類を添加することも可能です。塩としては硝酸カルシウムまたは硫酸カルシウムを用い、必ず pH が3 ~ 7 になる
ようにしてください。重金属を多く含む試料の分析では、溶離液に 10 ~ 50 µg/mL 程度の Ca-EDTA を添加する
ことによりカラム性能の低下を防ぐことができます。
(3) アセトニトリルまたはエタノールの添加が可能です。添加量は 20 % (v/v)以下にしてください。
注意 ※使用条件を順守してください。使用可能範囲外での使用は、カラムを劣化させるおそれがあります。
※カルシウム塩以外の塩は使用しないでください。他の塩を使用すると、スルホ基の対イオンがカルシウム
イオンから別の陽イオンに置換され、カラムを劣化させるおそれがあります。
※塩の水溶液と有機溶媒の混合溶媒を使用する場合は、塩が析出しないことを確認してください。
※カラム圧力は、溶離液組成、流量、カラム温度によって変動します。溶離液の組成を変更する場合は、
使用可能最大圧力を超えないように流量やカラム温度を調整してください。
5. 溶離液の調製
(1) 気泡の発生を防ぐため、溶離液は十分に脱気してください。
(2) 微細なゴミや不溶物が混在すると、カラムの性能低下やクロマトグラムのノイズの原因となりますので、メンブラン
フィルター(0.45 μm)で溶離液をろ過してください。
注意 ※水は、超純水製造装置で用時調製した水や開封直後の HPLC グレードの蒸留水を使用してください。
有機溶媒は、HPLC で問題無く使用できる品質が保証された HPLC グレードの使用をお勧めします。
異なるグレードの有機溶媒を用いる場合は、分析に適した品質であることを確認してから使用して
ください。なお、開封後、長時間経過したものは使用しないでください。変性や吸湿、汚染などが起きて
いる可能性があります。
※長期間保存した溶離液は使用しないでください。組成の変化などにより、溶出挙動の変化やカラムの
劣化につながるおそれがあります。
参考 ※オンラインで脱気が可能なデガッサの使用をお勧めします。
6. 試料の調製
(1) 試料の溶解および希釈には、できるだけ溶離液を用いてください。溶離液に溶解しにくい場合は、可能な限り
溶離液組成に近づけるようにしてください。
(2) 粒子状物質（不溶性物質）の目詰まりによるカラムの劣化もしくは性能の低下を防ぐため、試料はあらかじめ
メンブランフィルター(0.45 μm)などでろ過してください。
(3) 試料注入量はカラム 1本あたり 20 μL 以下が目安です。
(4) 試料溶液が酸性またはアルカリ性の場合は、必ず中和してください。
(5) 試料溶液中にカルシウムイオン以外の陽イオンが含まれる場合（中和後も含む）は、陽イオン交換樹脂などにより
除去してください。
(6) タンパク質や脂質などを含む試料は、必ず除タンパクや脱脂を行なってください。除タンパクには酸添加や
アセトニトリル添加、限外ろ過などの方法があります。酸添加の場合は、必ず中和してから注入してください。また、
アセトニトリル添加の場合は、アセトニトリルの終濃度を 20 % (v/v)以下にしてから注入してください。
(7) 有機酸を多く含む場合は、OH 型の陰イオン交換樹脂などにより除去してください。
(8) 疎水性物質や界面活性剤が含まれる場合は、逆相系固相抽出などにより除去してください。
注意 ※試料を溶離液と異なる溶媒で溶解させた場合、溶離液に不溶な成分が存在すると注入後に析出
してカラムを詰まらせるおそれがあります。
※試料濃度が高すぎたり、試料注入量が多すぎるとカラム本来の性能が十分に発揮できず、ピーク形状の
異常や分離不良、再現性の低下などにつながるおそれがあります。そのような場合は、試料溶液の希釈
や注入量の減少を適宜行ってください。
