ver.20221202C
株式会社力森诺科 (https://www.shodex.com/)
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注意 ※色谱柱不能使用的溶剂在流路中残留可能会造成色谱柱的劣化。
※流动相组成发生显著变化,可能造成泵、管路中的污垢脱落,可能会造成色谱柱的劣化。
7-2. 色谱柱的连接
(1) 查看色谱柱身标签,然后将色谱柱连接到设备,使流动相沿流动方向(➡)流动。
(2) 请一边按住配管一边拧紧色谱柱的末端接头,防止配管和末端接头中产生空隙。空隙会造成样品的扩散,
导致色谱峰变宽。
(3) 将流速设置为 0.5 mL/min 以下然后开始送液。在升温使用色谱柱时,以低流送液直到达到设定温度,然后
逐渐将流速增加到所需流速。
警告 ※请检查溶剂是否泄露。否则可能会造成漏电、腐蚀或化学损坏。
注意 ※色谱柱连接到仪器上时,请避免气泡进入色谱柱,否则可能造成色谱柱劣化。
※当连接色谱柱或从停泵状态开始送液时,以 0.5 mL/min 以下的流速送液,压力突然升高可能会使
色谱柱劣化。
※色谱柱升温使用后,请使用 0.5 mL/min 以下的流速继续送液至色谱柱回复室温后再停泵。如果在
色谱柱温度很高时停止送液,当流动相温度降低时发生收缩会造成色谱柱内部空隙,使色谱柱劣化。
参考 ※建议设置泵的报警压力,以避免超过最大可用压力。
7-3. 流动相的置换
(1) 请事先确认柱中溶剂与要置换的溶剂是否互溶。
(2) 置换不互溶或溶解性低的溶剂时,先置换成双方溶剂都能互溶的溶剂,再置换成使用溶剂。
(3) 进行盐浓度梯度洗脱时,为了使分析结果具有良好的重现性,请按照如下步骤平衡色谱柱。
①使用 A溶液(低离子强度)通液 10 mL。
②使用 B溶液(高离子强度)通液 40 mL。
③使用 A溶液通液 15 mL 以上。
(4) 在进行梯度洗脱时,由于流动相成分的变化,在梯度洗脱过程中柱压可能超过最大可用压力。调整流速和柱
温,使其不超过最大可用压力。
7-4. 色谱柱清洗方法
流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内,可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化,这种情况
清洗色谱柱可能有改善效果。
几根色谱柱串联使用时,请分开清洗。清洗色谱柱时,请不要连接检测器,流动相从色谱柱流出后直接流入废液
缸即可。
如果清洗色谱柱后仍未改善,请更换新的色谱柱。
【清洗方法】
(1) 如果不溶物堵在色谱柱入口,可以逆接色谱柱并以小于正常流速一半的流速通流动相来将其除去。
(2) 吸附物质的具体清洗方法请参考下面例子。在清洗色谱柱时,请逆接色谱柱。
(清洗例) 使用流动相以 0.5 mL/min 的速度通液,再用浓度为 30 % (v/v) 的醋酸水溶液 1 ~ 2 mL 分数次从进
样器进样。